人70kDa熱休克蛋白1A(HSPA1A)ELISA試劑盒原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被70kDa熱休克蛋白1A（HSPA1A）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的70kDa熱休克蛋白1A（HSPA1A）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

血液樣本的收集：全血根據(jù)收集的條件分為不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)不抗凝分離出的上層黃色液體稱為血清；抗凝分離出的上層黃色液體稱之為血漿。1）不抗凝收集血清： 將收集好的全血靜置1-2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。2）抗凝收集血漿：收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿（也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿）待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素、EDTA和檸檬酸鈉。生化實(shí)驗(yàn)一般建議用肝素抗凝。

人70kDa熱休克蛋白1A(HSPA1A)ELISA試劑盒需自備物品：

1.      酶標(biāo)儀（450nm）

2.      高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.      37℃恒溫箱

實(shí)驗(yàn)前的注意事項(xiàng)：

1. 在實(shí)驗(yàn)開始之前，安排好實(shí)驗(yàn)流程并清潔工作臺(tái)。

2. 檢查不穩(wěn)定或者變質(zhì)的試劑溶液（比如沉淀或變色），切勿使用不同生產(chǎn)批號(hào)的試劑取代現(xiàn)有試劑或混合現(xiàn)有試劑。

3. 在混合或溶解蛋白溶液時(shí)，避免泡沫產(chǎn)生。

4. 我司僅對(duì)試劑盒本身負(fù)責(zé)，不對(duì)因使用該試劑盒而造成的樣本消耗負(fù)責(zé)。請(qǐng)使用者在實(shí)驗(yàn)前充分考慮實(shí)驗(yàn)所需的樣本量。

5. 嚴(yán)格按照說明書步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，任何一項(xiàng)步驟缺一不可（均會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗）

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