【產(chǎn)品用途】：本試劑盒僅供科研使用，定量檢測細(xì)胞液、體液、組織、血清、血漿等標(biāo)本中人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶的含量。凡訂購我司任意一款試劑盒均享受免費(fèi)代測服務(wù)，歡迎咨詢、訂購！

產(chǎn)品詳情：

【產(chǎn)品名稱】：人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶科研ELISA試劑盒

【產(chǎn)品規(guī)格】：96T/盒：可檢測90個樣；48T/盒：可檢測42個樣

【特異性】:可同時檢測天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。

【保存條件】：2~8℃，保質(zhì)期為6個月，均提供最新批次。

【待檢樣本】：組織勻漿、血清、血漿、尿液、腦脊液、胸腹水、細(xì)胞培養(yǎng)上清等相關(guān)液體樣本。

【產(chǎn)品特點(diǎn)】：靈敏度高，反應(yīng)性快，操作簡單。

【適用范圍】：僅供科學(xué)研究使用，不得用于臨床。

【特色服務(wù)】：免費(fèi)代測，支持定制

實驗材料與試劑配制：

1.  儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。

2. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

樣品收集、處理及保存：

【細(xì)胞培養(yǎng)上清】：適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

【血清】：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。

【血漿】：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

 【體液】：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

 【樣本要求】：樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

 【樣本保存】：如果樣品不能立即檢測，應(yīng)將其分裝，-80 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶科研ELISA試劑盒組成及試劑配備：（檢測范圍請參考說明書）

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注意事項：

1）嚴(yán)格按照規(guī)定的時間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果，所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃，使用后立即冷藏保存試劑。

2）洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果，在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體，溫育過程中不要讓微孔干燥。

3）消除底板殘留的液體和手指印，否則影響OD值。

4）底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。

5）避免試劑盒標(biāo)本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。

6）任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體，避免影響試劑中的生物活性。

7）平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

 關(guān)于做ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線時需要注意的細(xì)節(jié)問題：

1. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍要有一個比較大的跨度，并且要能覆蓋你所要檢測實驗樣品的濃度，即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍之內(nèi)，包括上限和下限。而對于呈S型的標(biāo)準(zhǔn)曲線，盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度*陡段，即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi)。

2. 檢測標(biāo)準(zhǔn)樣品時，應(yīng)按濃度遞增順序進(jìn)行，以減少高濃度對低濃度的影響，提高準(zhǔn)確性。

3. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的樣品數(shù)一般為7個點(diǎn)，但至少要保證有5個點(diǎn)。

4. 做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)因?qū)嶒炓蟛煌兴儎樱话銇碚f，相關(guān)系數(shù)R至少要大于0.98，對于有些實驗，至少要0.99甚至?xí)r0.999.

5. 樣品的濃度等指標(biāo)時根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出來的，所以首先要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作時比做正式實驗還要重要的一件事，否則后面的實驗結(jié)果無從談起。

6. *采用倍比稀釋法配置標(biāo)準(zhǔn)曲線中的標(biāo)準(zhǔn)品濃度，這樣就能夠保證標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度不會出現(xiàn)較大的偏離。

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