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豬源結腸彎曲菌分離鑒定及細胞致死性膨脹毒素三重PCR分子檢測

李海利; 徐引弟; 方劍玉; 焦文強; 王治方; 張青嫻; 朱文豪; 王克領; 郎利敏; 張立憲; 游一; 侯自花 河南省農業科學院畜牧獸醫研究所; 河南鄭州450002

摘要:為了探明河南省及周邊地區豬源結腸彎曲菌病(campylobacteriosis)的流行情況,本研究對從省內外的豬場和屠宰場采集的豬結腸及糞便樣品,進行了病原菌的初步分離培養鑒定。對結腸彎曲菌細胞致死性膨脹毒素(cytolethal distending toxin,CDT)A、B、C型毒素基因進行了單一PCR檢測與擴增,在此基礎上建立了結腸彎曲菌細胞致死性膨脹毒素A、B、c型三重PCR檢測方法。該三重PCR方法可同時擴增出結腸彎曲菌A、B、c毒素型基因,具有較好的特異性。從97份豬結腸樣品中分離128株細菌,經16S rRNA基因擴增和結腸彎曲菌特異性引物PCR擴增,確定12株為結腸彎曲菌。本研究為豬源結腸彎曲菌的分離鑒定及結腸彎曲菌細胞致死性膨脹毒素A、B、c型毒素基因擴增提供基礎,可用于豬源結腸彎曲菌的鑒定及毒素鑒定、食品安全檢測與監測等。

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