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加急見刊

篩選地中海擬無枝酸菌無痕基因敲除菌株的簡便方法

張巧巧; 金哲男; 金紅星 河北工業大學化工學院; 天津300130; 樺川縣星火鄉中心校; 黑龍江佳木斯154332

摘要:將抗生素抗性基因作為標記篩選無痕基因敲除菌株比較費時,因而建立篩選無痕基因敲除菌株的簡便方法。通過敲除茄紅素生物合成途徑中第一個反應的酶編碼基因dxs(1-脫氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶基因),獲得白色地中海擬無枝酸菌突變菌株,以此菌株為受體菌,對S-丙二酰轉移酶基因(mtf)進行無痕敲除。針對菌落本身攜帶顏色的地中海擬無枝酸菌(橘紅色),利用茄紅素合成酶基因dxs無痕敲除獲得了白色菌株,在此基礎上進行mtf的無痕敲除。以茄紅素生物合成途徑中任意一個反應的酶編碼基因作為標記,很容易篩選得到無痕基因敲除的突變菌株。

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