微小RNA-7基因敲減對LPS誘導的腦部炎癥的影響
摘要：為研究微小RNA-7（microRNA-7, miR-7）基因敲減（knock down, KD）對LPS誘導的腦部炎癥的影響并探討其意義,課題組用LPS腹腔注射（2.5mg/kg體質量）WT小鼠建立腦部炎性損傷模型;HE染色觀察小鼠腦組織病理學變化,real-time PCR探針法檢測腦組織中miR-7的表達變化;進一步,用LPS腹腔注射（2.5mg/kg體質量）WT小鼠和miR-7KD小鼠;12h后,HE染色觀察小鼠腦組織病理學變化;real-time PCR檢測腦組織中炎性細胞因子IL-6、TNF-α和TGF-β的mRNA變化水平;ELISA檢測腦組織中炎性細胞因子IL-6、TNF-α和TGF-β的變化水平;Western blotting檢測信號通路Akt和p-Akt以及炎性信號通路NF-κB和p-NF-κB的表達變化。結果顯示小鼠炎性損傷模型腦組織中,HE示WT小鼠在注射LPS后,腦組織中炎性細胞浸潤顯著增多且miR-7的表達水平顯著升高（P〈0.01）;HE結果示miR-7 KD小鼠腦組織中炎性細胞浸潤較WT小鼠顯著增多;real-time PCR結果示促炎細胞因子IL-6（P〈0.01）和TNF-α（P〈0.01）的表達水平均顯著升高,而抑炎細胞因子TGF-β（P〈0.01）的表達水平顯著降低;ELISA結果顯示,促炎細胞因子IL-6（P〈0.01）和TNF-α（P〈0.01）的表達水平均顯著升高,而抑炎細胞因子TGF-β的表達水平顯著降低（P〈0.01）; Western blotting結果示miR-7 KD模型小鼠腦組織Akt和p-Akt表達沒有明顯變化,NF-κB（P〈0.05）和p-NF-κB（P〈0.01）表達均明顯增加。由此miR-7基因敲減顯著促進了腦組織炎性損傷的發生,與NF-κB信號通路傳遞改變相關,本研究為后續深入探討miR-7在腦部炎癥相關疾病的發生機制中的作用提供了前期實驗基礎。
注: 保護知識產權,如需閱讀全文請聯系現代免疫學雜志社
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