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匍枝根霉纖維素酶高產菌株的誘變選育及發酵優化

鄭賢金; 湯斌 安徽工程大學生物與化學工程學院; 安徽蕪湖241000

摘要:為提高纖維素酶產量,以匍枝根霉TP02為出發菌株,通過誘變選育纖維素酶高產突變株,并研究碳源、氮源以及氨基酸等物質對菌株產酶能力的影響.經紫外和甲基磺酸乙酯復合誘變后篩選得到一株高產菌株TZ03,其濾紙酶活(FPA)為4.96IU/mL,較TP-02提高了37.8%.優化后最佳發酵培養基為:微晶纖維素20g/L,魚粉蛋白胨10g/L,麩皮浸出汁2.5%,CaCl22g/L,MgSO4·7H2O4g/L,KH2PO43g/L,谷氨酰胺1g/L,PEG-40000.25g/L,Tween80200μL/L,微量元素液1mL/L.此條件下TZ03的FPA酶活高達11.58IU/mL.通過對發酵過程中溶氧、PH和補料條件的控制,進行10L發酵罐放大實驗,最終使該突變株的FPA酶活在84h達到峰值21.32IU/mL,與搖瓶發酵相比提高了89.8%,β-葡萄糖苷酶(BG)、內切酶(EG)和外切酶(CBH)的酶活峰值分別為41.0IU/mL、26.76IU/mL和16.94IU/mL.通過誘變及發酵優化成功提高了纖維素酶產量,為纖維素酶的工業化應用奠定了一定的基礎.

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