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Klf4抑制Wnt/β-catenin信號通路調控軟骨細胞增殖的研究

何旭; 薛艷; 王學宗; 曹月龍; 鄭昱新; 丁道芳 上海中醫(yī)藥大學附屬曙光醫(yī)院; 上海201203; 上海市中醫(yī)藥研究院骨傷科研究所; 上海201203

摘要：目的探討Klf4基因對大鼠軟骨細胞增殖影響及相關機制。方法從出生24 h SD幼鼠的股骨頭提取軟骨細胞,細胞免疫熒光鑒定Col2a1和Sox9基因的表達。轉染慢病毒載體PCDH-GFP-Klf4和輔助質粒PSPAX2及PMD2.0G至293ft細胞中產(chǎn)生慢病毒,48 h后收集病毒上清,用其感染大鼠軟骨細胞作為Klf4組,用PCDH-GFP慢病毒感染細胞作為對照組。采用CCK8法檢測2組細胞生長增殖變化;采用Western blot方法,分別檢測2組細胞中Klf4基因表達、增殖相關基因PCNA和CyclinD1蛋白表達、Wnt/β-catenin信號通路上下游基因表達情況。結果原代培養(yǎng)軟骨細胞均強表達Col2a1和Sox9基因。慢病毒PCDH-GFP-Klf4和PCDH-GFP成功感染軟骨細胞,Klf4基因在軟骨細胞過表達。Klf4組軟骨細胞生長明顯受到抑制,PCNA和CyclinD1蛋白表達和Wnt/β-catenin信號通路相關基因表達均明顯下調。結論過表達Klf4基因可能通過抑制Wnt/β-catenin信號通路相關分子的表達而抑制軟骨細胞增殖。

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