沉默F(xiàn)BI-1基因?qū)θ幮匀橄侔┘?xì)胞MDA-MB-231增殖和凋亡的影響
摘要:本研究旨在觀察短發(fā)夾狀RNA (short hairpin RNA, shRNA)介導(dǎo)的人類(lèi)免疫缺陷病毒短轉(zhuǎn)錄誘導(dǎo)物連接因子1 (FBI-1)基因沉默對(duì)三陰性乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231增殖和凋亡的影響。用qRT-PCR和Western blot分別檢測(cè)FBI-1、Bcl-2、Bax、cleaved-Caspase3和Survivin的mRNA和/或蛋白的表達(dá)水平;采用shRNA干擾技術(shù)沉默MDA-MB-231細(xì)胞中FBI-1基因的表達(dá);用CCK-8法以及克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖;用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡;用裸鼠皮下成瘤實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的成瘤能力。結(jié)果顯示,MDA-MB-231細(xì)胞的FBI-1 mRNA和蛋白的表達(dá)水平明顯高于正常乳腺上皮細(xì)胞MCF-10A;經(jīng)shRNA靶向沉默F(xiàn)BI-1基因表達(dá)后,細(xì)胞增殖能力明顯降低,細(xì)胞凋亡率顯著增高,伴隨Bcl-2和Survivin蛋白表達(dá)明顯下調(diào)、Bax蛋白表達(dá)顯著上調(diào)和Caspase 3活化,MDA-MB-231細(xì)胞的裸鼠皮下成瘤能力受抑制。以上結(jié)果提示,靶向沉默F(xiàn)BI-1基因表達(dá)可以抑制MDA-MB-231細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡并抑制細(xì)胞的裸鼠皮下成瘤能力。
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