1,2-二氯乙烷通過線粒體通路誘導(dǎo)人星形膠質(zhì)細胞凋亡研究
摘要:目的通過篩選細胞凋亡差異表達蛋白,探討1,2-二氯乙烷(1,2-DCE)誘導(dǎo)人星形膠質(zhì)細胞(HAs)凋亡的相關(guān)分子機制。方法以終濃度分別為0-80 mmol/L或0-40 mmol/L的1,2-DCE染毒HAs,培養(yǎng)24 h后,采用磷脂結(jié)合蛋白Ⅴ-異硫氰酸熒光素/碘化丙啶流式細胞技術(shù)檢測細胞凋亡,采用AAH-APO-1-2蛋白芯片篩選差異表達蛋白,采用實時熒光定量-聚合酶鏈式反應(yīng)(qRT-PCR)驗證相關(guān)蛋白的差異表達基因。結(jié)果在1,2-DCE濃度為0-80 mmol/L時,隨著染毒劑量增加,HAs細胞總凋亡率升高,呈劑量-效應(yīng)關(guān)系(P〈0.01)。凋亡蛋白芯片篩選出7個差異表達蛋白,其中,與對照組比較,胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白(IGFBP)-1、IGFBP-4和細胞色素C(Cyto C)表達均上調(diào),P27、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B淋巴細胞瘤-2相互作用的細胞死亡中介物(BIM)和BH3交叉域死亡受體激動劑(BID)表達均下調(diào)。差異表達基因的qRT-PCR驗證結(jié)果顯示,40 mmol/L劑量組HAs中IGFBP-1、IGFBP-4和Cyto C的mRNA表達上調(diào),與蛋白芯片的表達趨勢一致;該組HAs中Caspase-3、BIM、BID的mRNA表達也上調(diào)。結(jié)論 1,2-DCE可能通過線粒體通路誘導(dǎo)HAs凋亡。
注: 保護知識產(chǎn)權(quán),如需閱讀全文請聯(lián)系中國職業(yè)醫(yī)學(xué)雜志社