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1,2-二氯乙烷通過線粒體通路誘導(dǎo)人星形膠質(zhì)細(xì)胞凋亡研究

陳鏗鏗; 賴關(guān)朝; 曾麗海; 梁博萱; 鐘怡洲; 陳念光; 黃曼琪; 鄭杰蔚; 江亮; 林莉; 劉俊; 江俊瑩; 鄭倩玲; 黃振烈 廣東省職業(yè)病防治院廣東省職業(yè)病防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 廣東廣州510300; 中山大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院; 510275; 南方醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院食物安全與健康研究中心; 510515; 廣東藥科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院; 510315

摘要:目的通過篩選細(xì)胞凋亡差異表達(dá)蛋白,探討1,2-二氯乙烷(1,2-DCE)誘導(dǎo)人星形膠質(zhì)細(xì)胞(HAs)凋亡的相關(guān)分子機(jī)制。方法以終濃度分別為0-80 mmol/L或0-40 mmol/L的1,2-DCE染毒HAs,培養(yǎng)24 h后,采用磷脂結(jié)合蛋白Ⅴ-異硫氰酸熒光素/碘化丙啶流式細(xì)胞技術(shù)檢測細(xì)胞凋亡,采用AAH-APO-1-2蛋白芯片篩選差異表達(dá)蛋白,采用實(shí)時(shí)熒光定量-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(qRT-PCR)驗(yàn)證相關(guān)蛋白的差異表達(dá)基因。結(jié)果在1,2-DCE濃度為0-80 mmol/L時(shí),隨著染毒劑量增加,HAs細(xì)胞總凋亡率升高,呈劑量-效應(yīng)關(guān)系(P〈0.01)。凋亡蛋白芯片篩選出7個(gè)差異表達(dá)蛋白,其中,與對照組比較,胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白(IGFBP)-1、IGFBP-4和細(xì)胞色素C(Cyto C)表達(dá)均上調(diào),P27、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B淋巴細(xì)胞瘤-2相互作用的細(xì)胞死亡中介物(BIM)和BH3交叉域死亡受體激動(dòng)劑(BID)表達(dá)均下調(diào)。差異表達(dá)基因的qRT-PCR驗(yàn)證結(jié)果顯示,40 mmol/L劑量組HAs中IGFBP-1、IGFBP-4和Cyto C的mRNA表達(dá)上調(diào),與蛋白芯片的表達(dá)趨勢一致;該組HAs中Caspase-3、BIM、BID的mRNA表達(dá)也上調(diào)。結(jié)論 1,2-DCE可能通過線粒體通路誘導(dǎo)HAs凋亡。

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