CLARITY技術在小鼠急性腎損傷模型中的應用
摘要:目的 基于小鼠急性腎損傷模型探討CLARITY技術在病理診斷中應用的價值。方法 將24只昆明小鼠隨機均分為實驗組和對照組,每組(各12只)分別建立左側輸尿管完全梗阻模型,0d、2d、4d、6d后每次取3只實驗組小鼠進行透明化處理,對照組行常規HE染色。聯合應用肉眼觀察法、激光共聚焦顯微鏡觀察法和常規顯微鏡觀察法檢測腎臟組織的形態學改變。采用TissueFAXSTMCytometry組織細胞定量分析系統對共聚焦顯微鏡二維圖片中的腎小管上皮細胞數量和腎小管管腔面積進行定量分析。結果 肉眼觀梗阻側腎臟,隨著時間延長,腎體積增大、充血、水腫,腎盂和輸尿管擴張,腎實質結構逐漸萎縮,腎盞融合,腎皮質開始變薄;實驗組和對照組均觀察到腎臟梗阻后腎小管上皮細胞扁平化、擴張,隨著梗阻時間延長,逐漸出現腎小管萎縮消失、組織結構破壞,典型形態消失,纖維結締組織增生,腎臟出現纖維化;實驗組采用激光共聚焦顯微鏡掃描發現同一個組織的不同層面腎小管上皮細胞數量和腎小管管腔面積分布明顯不同。結論 透明化技術可觀察急性腎損傷后腎臟不同組織層面的病理改變,比HE染色的二維層面提供更多的信息,在病理學和形態學研究領域有較高的應用價值。
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