扶正透毒祛毒復(fù)方含藥血清干預(yù)T-ALL-CR患者骨髓CD34^+細(xì)胞源DC誘導(dǎo)的研究
摘要:目的:探討加味青蒿鱉甲湯對(duì)干預(yù)誘導(dǎo)的T-ALL-CR患者骨髓CD34+細(xì)胞源樹突細(xì)胞的影響。方法:分別用高、中、低劑量加味青蒿鱉甲湯煎劑灌胃健康新西蘭大白兔制備高、中、低濃度的含藥血清;用Ficoll密度梯度離心法分離T-ALL-CR患者骨髓獲得骨髓單個(gè)核細(xì)胞(Bone Marrow Nucleated Cell,BMNC),用CD34+免疫磁珠陽(yáng)性選擇法提取BMNC中CD34+細(xì)胞;將CD34+細(xì)胞加入含細(xì)胞因子的培養(yǎng)體系中培養(yǎng)誘導(dǎo)DC,并分組加入高、中、低劑量含藥血清干預(yù)誘導(dǎo),誘導(dǎo)過程中采用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)并拍照記錄,9天后收集細(xì)胞用流式細(xì)胞儀(Flow Cytometry,FCM)檢測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞CD80、CD86、CD83、CD1a、HLA-DR的表達(dá)以鑒定DC的成熟。結(jié)果:DC形態(tài)隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),觀察發(fā)現(xiàn)CD34+細(xì)胞逐漸聚集,出現(xiàn)不規(guī)則突起,形成集落,可見較為典型的DC形態(tài);誘導(dǎo)第9天后CD80、CD86、CD83、CD1a、HLA-DR所有表面抗原在各組中均有較高表達(dá),不同劑量含藥血清組的表達(dá)大多數(shù)優(yōu)于正常兔血清組及細(xì)胞因子組(P〈0.05),不同劑量含藥兔血清組間的表達(dá)無(wú)明顯差異(P〉0.05)。結(jié)論:不同劑量加味青蒿鱉甲湯含藥血清能促進(jìn)T-ALL-CR患者CD34+細(xì)胞源DC的成熟,能較高表達(dá)DC表面抗原CD83、CD86、CD80、CD1a、HLA-DR。
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