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肝靶向肽-抗腫瘤肽CSP-MDA-7/IL-24融合基因原核表達(dá)條件優(yōu)化

陳瑜麗; 張晶晶; 馬艷; 盧雪梅; 劉文彬; 金小寶; 汪潔 廣東藥科大學(xué)生命科學(xué)與生物制藥學(xué)院; 廣東廣州510006; 廣東藥科大學(xué)基礎(chǔ)學(xué)院藥用生物活性物質(zhì)研究所; 廣東廣州510006; 廣東省生物活性藥物研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 廣東廣州510006

摘要：目的：優(yōu)化肝靶向肽-抗腫瘤肽（CSP-MDA-7/IL-24）在大腸桿菌中誘導(dǎo)表達(dá)的相關(guān)條件。方法：通過考察CSP-MDA-7/IL-24重組菌生長(zhǎng)曲線,選擇合適的誘導(dǎo)時(shí)機(jī),通過SDS-PAGE檢測(cè)CSP-MDA-7/IL-24蛋白的表達(dá)量,單因素分析誘導(dǎo)時(shí)間、培養(yǎng)基p H值、誘導(dǎo)溫度和誘導(dǎo)劑IPTG濃度,在此基礎(chǔ)上各選取5個(gè)水平進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn),摸索最佳誘導(dǎo)表達(dá)條件。結(jié)果：培養(yǎng)基p H7.0、IPTG濃度0.12 mmol/L、培養(yǎng)溫度42℃、誘導(dǎo)表達(dá)4 h為重組蛋白的最佳表達(dá)條件。結(jié)論：為進(jìn)一步制備重組蛋白CSP-MDA-7/IL-24及評(píng)價(jià)其生物活性奠定了基礎(chǔ)。

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