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H5N8亞型流感病毒雙重實時熒光RT-PCR檢測方法的建立與評價

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摘要：流感病毒變異迅速，為研究和建立一種針對H5N8亞型流感病毒核酸準確靈敏的檢測方法，分別選擇H5N8亞型流感毒株序列相對保守的HA基因和NA基因作為H5N8亞型流感病毒檢測的靶序列，設計兩套特異性的引物和探針，選擇兩種不同的熒光標記，建立基于TaqMan探針的雙重熒光RTPCR快速檢測H5N8亞型禽流感病毒檢測方法。實驗結果表明，所建立的H5N8亞型流感病毒real time RT-PCR檢測方法HA基因檢測的靈敏度為10^-5，NA基因檢測的靈敏度為10^-5，重復性好。特異性佳。結果表明：本研究建立的雙重熒光定量RT-PCR技術可以快速、準確地檢測H5N8亞型流感病毒，耗時短，可很快作出判定結果，適用于H5N8流感病毒的分子生物學檢測和監測。對于控制流感流行，減少經濟損失，最大限度保護社會人群健康具有很大意義。

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