聚乙烯亞胺增強Pluronic介導的BALB/c小鼠骨骼肌原位基因傳遞和表達效率
摘要：目的 在Pluronic L64介導的BALB/c小鼠骨骼肌基因傳遞體系中正確引入聚乙烯亞胺(PEI)以增強基因表達效率。方法以生理鹽水組、質粒DNA (p DNA)組和Pluronic L64/p DNA (L/D)組為對照組,各比例PEI/p DNA與Pluronic L64混合物(L/P/D-0. 5、L/P/D-3、L/P/D-10)為實驗組,將各組樣品注射到小鼠脛骨前肌中。7 d后取組織,檢測報告基因表達(β-半乳糖苷酶和熒光素酶)和肌肉組織病變情況。通過尾靜脈注射考察L/P/D-0. 5組的體內急性毒性。最后,通過動態光散射儀和原子力顯微鏡測定L/P/D-0. 5組中PEI/p DNA復合物的粒徑、電位及形貌。結果 1)報告基因表達評估:L/P/D-0. 5組外源基因表達效率最高;隨著N/P增加,幾乎檢測不到外源基因的表達。2)生物相容性評估:無論原位注射還是尾靜脈注射,L/P/D-0. 5組均沒有顯示出組織病變,而其他比例的L/P/D組出現了不同程度的組織學病變。3)物理特征表征:雖然在L/P/D-0. 5組中DNA未被完全壓縮,但PEI/p DNA復合物已擁有良好的納米粒徑和形態結構,且表面電位為負。結論 L/P/D-0. 5體系能安全有效地增強外源基因在骨骼肌內的表達。
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