凡納濱對蝦細胞色素P450(CYP370C2)基因的克隆與表達分析
摘要：細胞色素P450(CYP)酶系在機體的毒素、污染物和藥物等代謝過程中發(fā)揮著重要作用,為深入了解對蝦CYP基因的結構和功能,采用c DNA末端快速克隆技術得到凡納濱對蝦Litopenaeus vannamei CYP家族基因CYP370C2的全長c DNA序列,共1 745 bp,包含1個1 464 bp的開放閱讀框,編碼487個氨基酸。CYP370C2基因序列中具有CYP蛋白特有的血紅素結合區(qū)、Ⅰ螺旋保守區(qū)、C螺旋保守區(qū)和K螺旋保守區(qū)。同源性比對結果顯示,凡納濱對蝦CYP370C2基因序列與三疣梭子蟹Portunus trituberculatus的CYP基因相似度最高,為64%。CYP370C2基因在所有檢測的組織中均有表達,在肝胰腺中的表達量最高,鰓和腸道次之。在48 h的氨氮脅迫試驗中,脅迫24 h后,肝胰腺和鰓中的CYP370C2基因相對表達量與對照組相比均顯著上調,分別在48 h和24 h達到峰值。脂多糖(LPS)注射后,CYP370C2基因在肝胰腺中的相對表達量在3 h開始顯著上升,在12 h達到最大值; CYP370C2基因在鰓中的表達在LPS注射后的3 h和6 h被顯著抑制,12 h恢復至對照組水平,隨后在24 h和48 h顯著上調。這些實驗結果顯示,CYP370C2基因參與了氨氮脅迫響應和LPS刺激響應,表明CYP370C2基因可能在凡納濱對蝦抗環(huán)境脅迫和抗病原體的免疫防御過程中均發(fā)揮重要作用。
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