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加急見刊

不同RNA提取方法的效能比較

李冉冉; 王兵; 胡勝; 李洋; 翟永杰; 李彩霞; 孫啟凡; 季安全 公安部物證鑒定中心、北京市現(xiàn)場物證檢驗工程技術(shù)研究中心、現(xiàn)場物證溯源技術(shù)國家工程實驗室; 北京100038; 濟寧醫(yī)學院司法鑒定中心; 山東濟寧272067; 西安市公安局未央分局; 西安710016; 呼和浩特市公安局; 呼和浩特010090; 山西醫(yī)科大學; 太原030001

摘要：目的比較7種不同的RNA提取方法(6種商業(yè)化試劑盒加Trizol有機提取法)的相對提取效率,為法醫(yī)實踐中選擇提取高質(zhì)量的RNA/miRNA提供參考。方法分別使用6種不同的商業(yè)化試劑盒以及Trizol有機提取法提取晾干的外周血棉簽樣本,通過對RNA進行紫外熒光定量檢測、瓊脂糖凝膠電泳檢測和測定樣本中內(nèi)參基因RNU6b的相對含量等方式進行評價。結(jié)果各試劑盒所提RNA/miRNA的質(zhì)量評估和表達分析結(jié)果有明顯差異,其中Trizol有機提取法和試劑盒RNeasy^■Mini可以得到更高質(zhì)量和純度的RNA/miRNA,170μL外周血中所提取的RNA總量可達到(3860.50±182.12)ng、純度(OD260/280)約為1.84±0.03,且瓊脂糖電泳結(jié)果顯示RNA完整性好,在后續(xù)實驗中表現(xiàn)良好。結(jié)論在所有的提取方法中,綜合考慮RNA的數(shù)量、質(zhì)量以及RealtimePCR檢測結(jié)果,更適合提取外周血RNA的方法為RNeasy^■MiniKit和Trizol有機提取法。

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