藏獒犬IFNγ基因的克隆表達及其生物學活性測定
摘要：通過RT-PCR技術從刺激的藏獒犬外周血淋巴細胞中成功克隆IFNγ全基因,其大小為501bp,編碼167個氨基酸,前23個AA為信號肽,與GenBank上發表的犬IFNγ（（NM001003174.1）比較,序列的同源性為99.4%。構建了原核表達載體pET-30a-IFNγ,轉化BL2L,IPTG誘導后表達約23Kd的重組蛋白,經鎳瓊脂糖凝膠層析柱純化后,純度達90%以上;利用抑制病毒噬斑法測定重組藏獒犬γ干擾素的生物學活性,結果顯示純化的蛋白具有一定的抗病毒活性,本研究結果為進一步研究犬γ干擾素的抗病毒活性奠定基礎。
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