定向進化后Cne PRP8蛋白質內含子的剪接機理研究
摘要：蛋白質內含子（intein）介導的蛋白質剪接（protein splicing）為蛋白質工程的發展展現了無限的新希望。但是到目前為止蛋白質剪接機理尚未清楚，因而它極大地制約了蛋白質內含子及其介導的蛋白質剪接在蛋白質工程領域的廣泛應用。以來自于真核生物核基因組中的蛋白質內含子 Cne PRP8為研究對象，通過“隨機突變-功能選擇-定向進化”后，對進化后的蛋白質內含子 Cne PRP8關鍵部位氨基酸進行突變、恢復突變，試圖揭示 Cne PRP8蛋白質內含子的剪接機理。研究結果表明， Cne PRP8蛋白質內含子的剪接仍然與其1位和正1位相關，但其剪接反應還與其52位、68位、114位和146位的氨基酸相關，推測該位氨基酸的突變改變了剪接活性中心的空間構象，從而影響了蛋白質內含子的剪接。這一研究揭示了真核生物蛋白質內含子的剪接過程不僅與其1位和正1位等氨基酸殘基相關，也與其他位點氨基酸密切相關，仍需進一步探索與研究。
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