進境蘋果中3種檢疫性真菌三重PCR同步檢測方法的建立
摘要：蘋果殼色單隔孢潰瘍病菌（Botryosphaeria stevensii）、美澳型核果褐腐病菌（Monilinia fructicola）和丁香疫霉病菌（Phytophthora syringae）是為害多種水果和其他植物的重要檢疫性真菌,均能侵染蘋果果實導致爛果,并造成嚴重的經濟損失。本研究設計和篩選了3對特異性引物,建立了同步檢測3種檢疫性真菌的普通PCR和三重PCR方法。設計的引物Bs-368 F/R、M.cola 986F/R和Psy1/Psy2能分別特異性地擴增出B.stevensii、M.fructicola和P.syringae所有供試菌株的DNA,而對相應多個近似種的DNA則無擴增。靈敏度試驗結果表明,上述3對引物分別檢測B.stevensii、M.fructicola和P.syringae DNA的靈敏度是41.7 pg、47.4 pg和0.375 pg,三重PCR同時檢測到3種病菌DNA的靈敏度是4.44 ng。該方法可以滿足對進境蘋果果實攜帶的蘋果殼色單隔孢潰瘍病菌、美澳型核果褐腐病菌和丁香疫霉病菌的快速初篩,加速進境新鮮水果的快檢快放。
注: 保護知識產權,如需閱讀全文請聯系植物檢疫雜志社
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