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加急見刊

重組質粒pGEM-HERV-Kgag的構建與鑒定

張宗彥; 張雯; 劉妙齡; 賁亞琍 江漢大學醫學院免疫疾病研究所; 湖北武漢430000; 江漢大學學生工作部; 湖北武漢430000

摘要：目的 構建pGEM-HERV-K gag 重組質粒.方法： 分離人外周血單核細胞,提取總RNA,逆轉錄得到cDNA,PCR擴增目的基因后回收并純化目的基因,TA基因克隆方法構建重組質粒,并采用酶切和PCR進行鑒定.結果： 以PBMC的cD？NA為模板,PCR擴增獲得446 bp 的HERV-K gag 目的基因,克隆到pGEM-T載體構建pGEM-HERV-K gag 重組質粒,酶切及PCR結果證實重組質粒構建成功.結論： 成功構建pGEM-HERV-K gag 質粒,此方法可用于比較病人與健康人的gag 基因的序列.

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