甜櫻桃砧木PcMPK3基因啟動(dòng)子的克隆及對(duì)病原菌感染的響應(yīng)
摘要:【目的】探明PcMPK3基因的表達(dá)調(diào)控規(guī)律。【方法】利用染色體步移技術(shù)從甜櫻桃矮化砧木Gisela 6中克隆PcMPK3基因的啟動(dòng)子序列PcMPK3pro。利用Neural Network Promotor Prediction、softberry、PLACE和PlantCARE網(wǎng)站在線預(yù)測(cè)PcMPK3基因的基礎(chǔ)啟動(dòng)子、轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)和順式作用元件。將PcMPK3pro定向替換植物表達(dá)載體pBI121-SN1的CaMV35S組成型啟動(dòng)子,構(gòu)建重組表達(dá)載體pBI-PcMPK3pro:GUS,瞬時(shí)轉(zhuǎn)化煙草葉片。【結(jié)果】結(jié)果表明,PcMPK3pro含有啟動(dòng)子核心元件TATA-box和CAAT-box等多種響應(yīng)脅迫的順式作用元件。受病原菌丁香假單胞菌番茄致病變種(Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000,Pst DC3000)侵染,PcMPK3pro能驅(qū)動(dòng)GUS報(bào)告基因表達(dá)且GUS酶活性顯著提高。【結(jié)論】推測(cè)PcMPK3基因參與植物響應(yīng)病原菌感染的脅迫過程。
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