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重組酶聚合酶擴增技術(RPA)檢測擬態弧菌

周廣彪; 段建發; 胡曉珊; 魏霜; 凌莉; 蔡穎 汕頭海關; 廣東汕頭515031; 廣州海關

摘要:根據編碼擬態弧菌不耐熱溶血素(Vibrio mimicus heat-labile hemolysin,VmhA)的基因保守序列,設計重組酶聚合酶擴增(RPA)特異性引物,建立擬態弧菌vmhA基因的RPA檢測方法并測試其特異性、靈敏度和應用效果。結果顯示,建立基于RPA的檢測方法特異性好,能夠從擬態弧菌中擴增得到467bp的特異性條帶,僅需在37%下恒溫反應40min,不需要特殊的儀器設備;對比RPA和PCR兩種檢測方法的靈敏度一致,均達到0.1ng/μL。應用檢測結果也表明該方法與傳統培養方法相當。因此,本研究建立的RPA方法檢測vmhA特異性強、靈敏度高,無需特殊的儀器設備,適合實驗室快速檢測。

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