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加急見(jiàn)刊

轉(zhuǎn)基因及相關(guān)亞品系魚腥藻的純化

朱嘉誠(chéng); 賀嬋娟; 賈曉會(huì); 顧娟; 施定基; 莊旻敏; 馮思豫; 賈睿; 欒必榮; 何培民 上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院; 上海201306; 鎮(zhèn)江天和生物技術(shù)公司; 江蘇鎮(zhèn)江212200; 中國(guó)科學(xué)院植物研究所; 北京100093

摘要：轉(zhuǎn)基因藍(lán)藻純化是研究其生理、生化、分子生物學(xué)、營(yíng)養(yǎng)學(xué)、藥理學(xué)、毒理學(xué)等必不可少的環(huán)節(jié),更是其作為生產(chǎn)原料的基礎(chǔ)。傳統(tǒng)純化方法僅對(duì)不同物種間的分離進(jìn)行了討論,尚未涉及野生藻種和轉(zhuǎn)基因突變株在實(shí)驗(yàn)和生產(chǎn)中相互污染情況下的鑒別和分離。本文的轉(zhuǎn)基因藻純化方法先后從種群、細(xì)胞、分子3個(gè)層面純化分離了藻種。該方法使用平板劃線的方法將雜藻雜菌與魚腥藻分離,再使用核酸電泳、RT-qPCR、Western Blot將魚腥藻野生種、轉(zhuǎn)空載體突變株以及轉(zhuǎn)目的基因突變株3個(gè)亞品系逐步分離。純化分離后的藻株生長(zhǎng)速率得到了提高,目的基因的表達(dá)效率增長(zhǎng),生產(chǎn)目的蛋白的產(chǎn)率自然增長(zhǎng)。本研究對(duì)轉(zhuǎn)基因藻在實(shí)驗(yàn)和生產(chǎn)中出現(xiàn)的一些問(wèn)題提出了相應(yīng)的解決方案,對(duì)轉(zhuǎn)基因微藻的應(yīng)用具有積極的作用。

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