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加急見刊

巴西龜眼炎病原菌的分離鑒定及組織病理學研究

葉明皓; 胡秀彩; 呂愛軍; 孫敬鋒; 劉小雪; 宋亞嬌 天津農學院水產學院; 天津市水產生態及養殖重點實驗室; 天津300384; 河南師范大學水產學院; 河南新鄉453007

摘要:為防治龜類細菌性眼炎病,從患眼炎巴西龜Trachemys scriptaelegans(體質量約150.0 g)眼內分泌液中分離獲得1株革蘭氏陰性細菌,編號為G0503菌株,通過細菌形態學觀察、理化特性、16S rDNA克隆和測序,以及構建系統發育進化樹分析等方法,對其進行了鑒定研究。結果表明:該分離菌與甘露糖、半乳糖、肌醇等反應為陽性,與賴氨酸、鳥氨酸脫羧酶等反應為陰性;進一步采用PCR方法擴增其16S rDNA序列,將其亞克隆至pMD18-T載體中測序,獲得片段大小為1500 bp,與模式菌株Providencia rettgeri DSM 4542(AM040492.1)序列一致性為99.30%;構建系統發育樹分析顯示,該菌與Providencia rettgeri(JN644501.1)自然聚為一支,最終判定G0503菌株為雷氏普羅威登斯菌Providencia rettgeri;藥敏試驗結果顯示,該菌株對頭孢哌酮、頭孢噻肟、諾氟沙星、左氟沙星、氟苯尼考等藥物敏感,對阿莫西林、氨芐西林、磺胺異惡唑、復方新諾明等耐藥;用該分離菌人工回歸感染巴西龜死亡率達40%,主要呈現眼睛腫大、黏液增多,停止攝食等特征,并且與自然發病龜臨床癥狀一致;組織病理學觀察顯示,病龜出現眼瞼上皮細胞減少、淋巴細胞浸潤等病理變化。本研究中首次報道巴西龜眼炎病原的分離鑒定,對該病防治可提供一定的參考依據。

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