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3D生物打印構建復層尿道組織的初步研究

皮慶猛; 王曉磊; 張志亮; 周碧玉; 任曉蕓; 陸毅; 黃一雄; 傅敏剛; 范志宏 上海交通大學醫學院附屬仁濟醫院整形外科; 上海市200129; 嶧城中醫院內科; 山東省棗莊市277300

摘要:目的 探討利用生物打印體外構建具有復層結構的尿道空腔組織的可行性。方法 將7%GelMA和2%Alginate制備復合水凝膠,分別同綠色和紅色的microbeads或2×10^6 cells/mL尿道上皮細胞和尿道平滑肌細胞混勻,通過本實驗室改進的同軸多通道打印系統,以10~20 μL/min的速度推進內、外層,以80~200 μL/min的速度推進CaCl2,邊打印邊交聯;打印后不含細胞的空腔結構,置于熒光顯微鏡下觀察;打印后含有細胞的組織,以尿道上皮細胞和尿道平滑肌細胞混合培養液于六孔板內體外培養,分別于第0~7天live/dead染色檢測細胞活力,F-actin染色檢測細胞鋪展情況;將培養24 h的打印后組織,予以紅色顏料灌注。結果 復合水凝膠混合microbeads后,熒光顯微鏡下可以清楚看到內、外雙層結構,復層管腔的內、外徑分別為(663.66±51.74)μm和(976.84±63.43)μm,內外亞層壁厚分別為(62.06±10.45)μm和(93.78±10.25)μm。尿道細胞在第0天和第7天的細胞活力分別為84.52%和86.26%,免疫熒光染色第7天F-actin染色鋪展均勻,提示細胞鋪展生長。灌注過程中,打印后空腔組織內紅色灌注液可以順利通過管腔結構,顏料并無外溢,管壁無破損。結論 利用復合水凝膠和同軸多通道生物打印系統可以初步構建尿道空腔結構,打印后尿道細胞可在空腔結構內長期存活。

注: 保護知識產權,如需閱讀全文請聯系組織工程與重建外科雜志社

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