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異體軟骨細胞誘導骨髓基質細胞成軟骨分化的量效關系

畢波; 劉天一; 楊平; 周廣東 復旦大學附屬華東醫院; 上海200040; 海交通大學醫學院附屬第兒人民醫院整形外科; 組織工程研究中心

摘要:目的 探討利用異體軟骨細胞作為誘導因素,與骨髓基質細胞(BMSCs)共培養體外構建軟骨復合物的可行性,以及兩種細胞混合比例與構建軟骨質量的量效關系。方法體外分別培養擴增BMSCs與異體軟骨細胞,軟骨細胞與BMSCs的混合比例分別為1:9(A組)、2:8(B組)、3:7(c組)、100%軟骨細胞(D組)、100%BMSCs(E組),以5.0×10^7/ml的細胞終濃度接種于聚羥基乙酸(PGA)材料支架上培養,各組標本均于體外培養6周后取材,通過大體觀察、糖胺聚糖(GAG)含量測定、組織學以及免疫組織化學等方法檢測組織工程化軟骨形成的情況。結果各組細胞均與材料黏附良好,C、D兩組標本基本保持原有的大小和形狀,外觀潔白、光滑類似軟骨組織;組織學顯示兩組均有連續的軟骨陷窩樣結構形成,免疫組織化學顯示有大量Ⅱ型膠原沉積。定量結果顯示,C組的GAG含量達到D組的70%以上。其他各組培養物體積明顯縮小,組織學及免疫組織化學顯示軟骨樣組織形成不佳。結論異體軟骨細胞與BMSC共培養可以構建出較好的軟骨組織,表明軟骨細胞對BMSCs發揮誘導作用,但是軟骨細胞必須達到一定的數量要求。

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