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金錢魚cyp17a1基因克隆、組織分布及在卵巢發(fā)育中的表達

翟毅; 劉建業(yè); 賈麗英; 江東能; 陳華譜; 李廣麗; 鄧思平 廣東海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院; 廣東湛江524088; 廣東省名特優(yōu)魚類生殖調(diào)控與繁育工程技術(shù)研究中心; 廣東湛江524088; 海洋生態(tài)與養(yǎng)殖環(huán)境湛江市重點實驗室; 廣東湛江524088

摘要：【目的】克隆金錢魚cyp17a1基因,分析其在組織中的分布、卵巢不同發(fā)育時期中的表達變化,為金錢魚繁殖生物學(xué)提供理論依據(jù)。【方法】通過金錢魚轉(zhuǎn)錄組文庫篩選和RT-PCR進行cyp17a1 c DNA序列擴增;用DNAstar軟件比較Cyp17a1同源性,MEGA5.0構(gòu)建系統(tǒng)進化樹,RT-PCR檢測cyp17a1組織表達,實時定量PCR檢測不同卵巢發(fā)育時期cyp17a1的表達量。【結(jié)果】金錢魚cyp17a1開放閱讀框編碼515個氨基酸殘基;Cyp17a1氨基酸序列與同屬鱸形目魚類Cyp17a1同源性較高（87.8%～92.7%）,與大黃魚最高（92.7%）,與其他目魚類同源性次之（72.7%～85.0%）,與硬骨魚類Cyp17a2或Cyp17a1-like同源性最低（48.2%～51.7%）;所有硬骨魚類Cyp17a1聚為一支,在Cyp17a1分支中,金錢魚與鱸形目魚類聚為一支;cyp17a1在性腺中表達量較高,在精巢中表達最強;在肝、腦和頭腎表達較弱;在脾臟、腸、心臟、肌肉和鰓中未檢測到表達;卵巢中cyp17a1的表達量隨卵巢發(fā)育逐漸增加,Ⅳ期卵巢中cyp17a1表達量最高。【結(jié)論】cyp17a1在性腺中表達量較高,在金錢魚卵巢發(fā)育過程中有重要作用。

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