橡膠樹HbMVK啟動子的克隆與缺失表達分析
摘要:為了研究橡膠MVK基因啟動子精細結構及功能,筆者利用PCR技術對橡膠樹HbMVK基因啟動子進行了克隆,并對其進行了生物信息學分析。結果表明,該啟動子序列全長1 696 bp,包含CAAT-box,TATAbox,CAT-box,LTR,GARE-motif,TCA-element等元件。此外,根據(jù)元件分布,構建橡膠樹HbMVK基因啟動子系列缺失和全長序列表達載體并轉化擬南芥。T2代轉基因擬南芥中,報告基因GUS組織化學染色結果表明:HbMVK啟動子全長序列和5'端-1 386 bp缺失,HbMVK啟動子驅(qū)動的GUS基因只在轉基因擬南芥實生苗胚軸中有極微弱表達。5'端-1 221 bp和-725 bp缺失,HbMVK啟動子驅(qū)動GUS基因表達的活性較強,而5''端-325bp缺失,HbMVK啟動子則完全失去活性,這表明啟動子核心調(diào)控元件位于-725 bp到-325 bp之間。
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