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MiR-26b通過下調(diào)COX-2表達(dá)抑制神經(jīng)膠質(zhì)瘤的增殖、侵襲和遷移

陳政綱; 王子珍; 鄭傳宜; 李大圩; 楊堃; 蔡望青 海南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院神經(jīng)外科; 海口570102; 中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院神經(jīng)外科; 廣州510120

摘要:目的:觀察不同級別神經(jīng)膠質(zhì)瘤中miR-26b和環(huán)氧化酶(COX)-2的表達(dá)情況,研究miR-26b對于神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖、侵襲和遷移的影響.方法:運(yùn)用Western印跡和實(shí)時(shí)定量熒光PCR(qRT-PCR)檢測不同級別神經(jīng)膠質(zhì)瘤中miR-26b和COX-2的表達(dá)情況;使用miR-26b mimic轉(zhuǎn)染人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞U87,上調(diào)miR-26b的表達(dá);qRT-PCR檢測miR-26b mimic轉(zhuǎn)染后miR-26b和COX-2 mRNA的表達(dá)變化情況;雙熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)檢測miR-26b對COX-2轉(zhuǎn)錄活性的影響;使用Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測miR-26b對人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞U87侵襲能力的影響;使用劃痕實(shí)驗(yàn)檢測miR-26b對人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞U87遷移能力的影響;使用CCK-8(cell counting kit-8)檢測miR-26對人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞U87增殖能力的影響;裸鼠體內(nèi)成瘤實(shí)驗(yàn)檢測過表達(dá)miR-26b后膠質(zhì)瘤細(xì)胞成瘤能力的變化.結(jié)果:隨著神經(jīng)膠質(zhì)瘤腫瘤級別的增加,miR-26b表達(dá)明顯降低(P<0.05),而COX-2明顯增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001);雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)證實(shí)miR-26b可以直接靶向調(diào)控COX-2的蛋白表達(dá)水平;使用miR-26bmimic明顯上調(diào)miR-26b的表達(dá)(P<0.05);上調(diào)miR-26b可以顯著降低COX-2的表達(dá)(P<0.05);上調(diào)miR-26b可以抑制神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖、侵襲和遷移能力(P<0.05).實(shí)驗(yàn)組和對照組相比腫瘤的質(zhì)量和體積都變小.結(jié)論:隨著神經(jīng)膠質(zhì)瘤腫瘤級別的增加,miR-26b表達(dá)逐漸降低,而COX-2表達(dá)逐漸增加.miR-26b可通過抑制COX-2表達(dá)從而抑制神經(jīng)膠質(zhì)瘤的增殖、侵襲和遷移.

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