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摘要：目的研究衣霉素(Tm)誘導(dǎo)腸上皮細(xì)胞發(fā)生內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(ERS)的過程中,ERS的不同通路調(diào)控還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶中調(diào)節(jié)蛋白P47 PHOX的表達(dá),以評估不同通路對氧化應(yīng)激(OS)的影響,探討ERS調(diào)控NADPH氧化酶的表達(dá)在克羅恩病的作用及可能機(jī)制。方法選取克羅恩病患者手術(shù)標(biāo)本10份作為實(shí)驗(yàn)組,再選取結(jié)腸癌患者癌旁正常腸黏膜手術(shù)標(biāo)本10份作為對照組,采用免疫組織化學(xué)方法檢測腸道標(biāo)本中GRP78蛋白和P47 PHOX蛋白的表達(dá)情況。隨后取離體培養(yǎng)的腸上皮細(xì)胞,觀察Tm刺激細(xì)胞后,GRP78和P47 PHOX蛋白表達(dá)的情況,并考察不同濃度的4-苯基丁酸鈉鹽(4PBA)是否可以抑制Tm誘導(dǎo)的GRP78和P47 PHOX蛋白表達(dá)。再分別抑制ERS不同通路IRE1α-XBP1S、IRE1α-TRAF2-JNK、PERK-eIF2α,檢測P47 PHOX蛋白表達(dá)的情況。結(jié)果與結(jié)腸癌癌旁正常腸黏膜標(biāo)本比較,克羅恩病腸黏膜標(biāo)本GRP78和P47 PHOX表達(dá)明顯升高。在離體的細(xì)胞中Tm誘導(dǎo)ERS發(fā)生,GRP78蛋白、P47 PHOX蛋白表達(dá)增加,而4PBA可以抑制上述蛋白的表達(dá)。抑制IRE1α-TRAF2-JNK、PERK-eIF2α途徑均可以使P47 PHOX蛋白下調(diào),而抑制IRE1α-XBP1S使P47 PHOX蛋白表達(dá)上調(diào)。結(jié)論 ERS可能通過調(diào)控NADPH氧化酶細(xì)胞溶質(zhì)中的調(diào)節(jié)蛋白P47 PHOX,從而影響OS,最終參與克羅恩病的發(fā)病過程。其中IRE1α-TRAF2-JNK、PERK-eIF2α途徑可能誘導(dǎo)P47 PHOX蛋白表達(dá)從而促進(jìn)OS的發(fā)生。而IRE1α-XBP1S可以降低P47 PHOX蛋白活性,對OS有保護(hù)作用,可增強(qiáng)細(xì)胞對應(yīng)激的適應(yīng)性。

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