基于掃描電化學顯微鏡技術研究細胞實時釋放ROS
摘要：本研究利用掃描電化學顯微鏡(SECM)技術考察了十四烷酰佛波醇乙酸酯(PMA)刺激肺癌細胞(A549)活性氧物種(ROS)的實時變化。以過氧化氫(H2O2)為目標檢測物,獲得了細胞氧化應激的電化學響應圖像。以氯化六氨基合釕(Ru(NH3)6Cl3)為體系介質,利用電流負反饋技術獲得細胞形貌的清晰圖像,同時優化獲得探針與基底之間的最佳檢測距離。將探針電位設定為過氧化氫的還原電位(-0.65V)時,通過電流成像圖可觀察到ROS實時釋放,實現了A549細胞被PMA即時刺激時ROS釋放的實時檢測。擴大掃描區域,獲得了不同個體細胞ROS釋放的SECM圖像,實現了SECM對ROS信號的實時捕捉及再現性。結果顯示:PMA可破壞細胞含氧物種的動態平衡,誘發細胞產生氧化應激響應。將探針放置在細胞ROS釋放位點,檢測其電流隨時間變化,可觀察到電流隨時間呈現波動狀態,推測ROS的胞外釋放是一個動態的脈動過程。
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