Clec14a基因調控斑馬魚胚胎血管發育
摘要：目的:探索Clec14a在斑馬魚胚胎期的表達及其在血管發育過程中的功能,探討該基因調控血管發育機制。方法:通過胚胎整體原位雜交技術,觀察Clec14a基因在斑馬魚胚胎期的表達情況;在轉基因斑馬魚系Tg(kdrl:mCherry)和Tg(fli1a:nGFP)中,顯微注射嗎啉修飾的反義寡核苷酸(morpholinoantisense oligos)下調Clec14a基因表達,同時在轉基因斑馬魚系Tg(kdrl:mCherry)中注射Clec14a-mRNA調控Clec14a基因表達,利用激光共聚焦顯微鏡觀察分析斑馬魚節間血管(intersegment vessel,ISV)表型,統計分析內皮細胞遷移速度和數目的變化,并應用qRT-PCR技術檢測下調后該基因mRNA表達情況。結果:在受精后24h、48h和72h,Clec14a基因在斑馬魚腦、心臟、血管系統中有表達;Clec14a基因表達下調導致ISV發育缺陷,內皮細胞數目減少,抑制其遷移速度。結論:下調Clec14a基因表達能夠通過抑制內皮細胞增殖和內皮細胞遷移調控斑馬魚胚胎血管發育。
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