【摘要】 目的探究性早熟動物模型的制備及觀察回歸平衡膠囊對性早熟大耳白兔的藥效學作用。方法用雞胚粉喂養大耳白幼兔制備性早熟模型；用回歸平衡膠囊對性早熟幼兔進行灌胃給藥1個月后，檢查回歸平衡膠囊對幼兔血清的性激素E2，PROG，TESTO，LH，FSH等的影響，進行組間差異顯著性比較。結果實驗給藥組的性激素水平較對照組有顯著降低。結論回歸平衡膠囊對性早熟大耳白兔有確切的治療作用。

【關鍵詞】 回歸平衡膠囊 藥效學 性早熟 大耳白兔

Study on Pharmacodynamics of Huigui Pingheng Capsules in the Therapy of Sexual Precocity of Special Rabbits

Abstract：ObjectiveTo study the model of the sexual precocious animal and to observe the pharmacodynamics of Huigui Pingheng capsules in sexual precocity of special rabbits. MethodsThe experimental sexual precocious model of special rabbits was made by feeding in stomach with chick embryo powder. These special rabbits in the experimental group were given with Huigui Pingheng capsules for one month. To check changes of the blood biochemical criterion of infant rabbits such as levels of hormone E2，PROG，TESTO，LH，FSH and compare with the normal control group. ResultsMost of the levels of blood hormone histology criterions of sexual precocity of special rabbits in the experimental groups were significantly reduced. ConclusionSexual precocity of special rabbits can be effectively treated with Huigui Pingheng capsules.

Key words：Huigui Pingheng capsules； Pharmacodynamics； Sexual precocity； Special rabbits

回歸平衡膠囊是由武漢市兒童醫院經驗處方研制而成，方中黃柏、龍膽、墨旱蓮、知母、熟地黃等具有清熱降火、滋補腎陰；臨床上用于小兒陰虛火旺證性早熟所致的陰、腋毛提前生長，乳房發育，骨齡提前等癥，臨床療效顯著。本文從實驗角度就回歸平衡膠囊治療性早熟藥效學進行了初步探討，為臨床應用提供理論依據。

1 材料

0.9%生理鹽水注射液（040319-213，武漢市濱湖雙鶴藥業有限責任公司）；雌二醇（E2）放免盒、孕酮（PROG）放免盒、血清睪酮（TESTO）放免盒、促黃體酮激素（LH）放免盒、促卵泡激素（FSH）放免盒［上述放免盒均由天津九鼎醫學生物工程有限公司提供］。

雞胚粉的制備：選取AE種雞卵（武漢市東西湖區東山種雞場）孵化14 d后，煮熟，去殼，烘干，粉碎，過4號篩，備用。雞胚粉懸浮液：在每次給動物灌胃之前，將雞胚粉加蒸餾水制成10 ml混懸液。蒸餾水為重蒸餾水；回歸平衡膠囊（040823，武漢市兒童醫院藥物研究室）。

儀器：Elecsys 2010 電化學發光免疫測定儀（瑞士羅氏公司生產，儀器編號:1537-27）；

LDZ4-0.8A型離心機（北京醫用離心機廠）。動物：日本大耳白兔，兔齡45～60 d，體重725～1 005 g，由湖北省疾病預防控制中心提供，動物編號：19-009-348。

2 方法與結果

2.1 動物分組空白對照組動物數12只：♀6只，♂6只。高濃度雞胚粉造模組動物數36只：♀18只，♂18只。低濃度雞胚粉造模組動物數12只：♀6只，♂6只。治療組動物數36只：♀18只，♂18只。生理鹽水對照組動物數12只：♀6只，♂6只。高劑量治療組動物數12只：♀6只，♂6只。低劑量治療組動物數12只：♀6只，♂6只。

2.2 性激素的測定方法放射免疫分析法（RIA）：取全血樣本，置離心機中離心（3 500 r/min）20 min，分離出血清（嚴重溶血的標本不能使用）；取血清樣本、標記物、抗體，采用雙管平行加樣法加樣，充分混勻，按不同放免盒的要求：分別置一定溫度下溫育其一定時間后，加入分離劑，充分混勻后，置4℃，3 600 r/min離心20 min，取沉淀部分，用γ-計數器測量沉淀部分的放射強度，從而測量出血清中各激素的含量值。

2.3 實驗與結果

2.3.1 造模實驗按實驗設計將動物雌雄分開，按動物分組隨機分成高濃度雞胚粉造模組，低濃度雞胚粉造模組，生理鹽水空白對照組。每只動物均灌胃給藥1個月。高濃度雞胚粉造模組前15 d，每天每兔灌雞胚粉1.5 g，后15 d每天灌2.5 g，均用蒸餾水在灌胃前配成懸濁液10 ml灌胃給藥；低濃度雞胚粉造模組前15 d，每天每兔灌雞胚粉0.7 g，后15 d每天灌1.3 g，均用蒸餾水在灌胃前配成懸濁液10 ml灌胃給藥；生理鹽水空白對照組每天每兔灌胃給10 ml生理鹽水。

在造模過程結束后，取兔耳緣靜脈血液3 ml于促凝管中；每只兔連續取血3次，前后兩次取血間隔時間為2 h，這樣可減少時效動力學造成的激素水平差異，取其3次測定的平均值；造模組間對照實驗結果見表1～2。表1 ♂造模組間對照實驗結果（略）表2 ♀造模組間對照實驗結果（略）

2.3.2 藥物治療實驗通過造模實驗結果可知，高濃度雞胚粉造模成功，各種激素水平都有顯著的改變，故我們用此組動物進行藥物療效觀察實驗。將造模成功的動物按雌雄分開，隨機分成回歸平衡膠囊高劑量治療組，回歸平衡膠囊低劑量治療組，生理水空白對照組。動物均采用灌胃給藥。高劑量治療組每天每兔灌回歸平衡膠囊藥粉2.0 g；低劑量治療組每天每兔灌上述藥粉1.0 g；上述灌胃藥品均溶于10 ml蒸餾水中制成水溶液，即每天每兔分別灌所含藥液體積為10 ml；生理鹽水對照治療組每天每兔灌同體積的生理鹽水。

給藥1個月后，取兔子的耳緣靜脈血液3 ml于促凝管中；每只兔連續取血3次，前后兩次取血間隔時間為2 h，這樣可減少時效動力學造成的激素水平差異，取其3次測定的平均值；組間治療對照實驗結果見表3～4。表3 ♂組間治療對照實驗結果（略）表4 ♀組間治療對照實驗結果（略）

2.3.3 自身對照實驗為了真實、客觀地了解每只動物的藥物治療情況，我們對每只動物的各種激素水平進行了治療前后自身對照統計。結果顯示，回歸平衡膠囊對模型動物的各種激素水平都有不同程度的改變。自身對照實驗結果見表5～6。表5 ♂組治療前后自身對照測定結果（略）表6 ♀組治療前后自身對照測定結果（略）

3 討論

3.1 根據中醫理論，性早熟的病變主要在腎肝兩臟，其發生多因肝郁化火或陰虛火旺，相火妄動所致。腎藏精，主生長發育與生殖，具有促進機體生長發育的生理效應。若小兒腎的陰陽不平衡，腎陰不足，相火偏亢則天癸早至。肝藏血，主疏泄，為調節氣機之主司，若肝失疏泄，肝郁化火，肝火上炎，反侮腎水亦可導致“天癸”早至，使第二性征提前出現。兒童性早熟的患兒中以虛證為多。回歸平衡膠囊以古代名方知柏地黃丸加減變化而來。方中黃柏能瀉腎中伏火；知母滋陰潤燥；熟地補血滋陰，益精填髓；龍膽專瀉肝膽之火，善清下焦濕熱；墨旱蓮具有補益肝腎涼血止血作用。諸藥合用共奏滋陰降火，滋補腎陰之功效，而治陰虛火旺所致的性早熟。

3.2 用雞胚粉制造日本大耳白兔的性早熟模型是成功的。其中，高劑量雞胚粉喂養大耳白兔后其性激素水平顯著高于空白對照組，具有顯著性(P<0.05)差異，但低劑量雞胚粉喂養組，其激素水平明亦高于對照組，但無統計學意義，說明制備兔子性早熟模型宜用高劑量雞胚粉灌胃。該性早熟造模具有一定的創新性。

3.3 在造模過程結束后，我們用回歸平衡膠囊對性早熟的大耳白兔進行了治療。從治療的結果看，高劑量治療組的治療效果明顯好于低劑量治療組；高劑量治療組各項激素水平都顯著低于生理鹽水對照組，具有顯著性（部分具有非常顯著性P<0.001）差異；而低劑量治療組只有兩項指標具有統計學意義，說明治療性早熟宜用高劑量的回歸平衡膠囊。

3.4 在飼養時，我們觀察到，應用回歸平衡膠囊治療的過程中，其用藥組兔的健康狀況明顯好于生理鹽水空白對照組，顯示該藥可能有提高兔子抗病能力的作用。