【關鍵詞】 藥動學

0引言

奈韋拉平（nevirapine）是人體免疫缺陷病毒（HIV1）的非核苷類逆轉錄酶抑制劑(NNRTI). 奈韋拉平與HIV1的逆轉錄酶（RT）直接連接并通過使此酶的催化端斷裂來阻斷RNA依賴和DNA依賴的DNA聚合酶活性［1］. 我們以國產奈韋拉平膠囊劑為受試制劑，進口奈韋拉平片為參比制劑，采用高效液相色譜法（HPLC）觀察健康男性受試者的血藥濃度經時過程，計算相應的藥動學參數，以評價奈韋拉平國產膠囊劑與進口片劑的生物等效性.

1材料和方法

1.1材料安捷倫1100液相色譜儀（美國安捷倫公司）；低溫高速離心機（德國SIGMA公司）；振蕩器（美國科爾帕默儀器公司）；萬分之一天平（上海衡平儀器儀表廠）. 甲醇、乙腈，色譜純，Merck公司生產；磷酸、磷酸二氫鈉、三氯乙酸、三乙胺，AR級，上海化學試劑公司生產. 受試制劑：國產奈韋拉平膠囊劑，批號 0309001，每粒200 mg，浙江華海藥業股份有限公司生產；參比制劑：進口奈韋拉平片，批號 304185d，每片200 mg，德國勃林格殷格翰生產；奈韋拉平標準品：批號556503002，含量99. 8%，浙江華海藥業股份有限公司提供.

1.2方法

1.2.1分組和血樣采集20例健康志愿者，男性，年齡18~22歲，體質量55~65 kg，身高160~172 cm. 受試前經體格檢查及血、尿常規等檢查正常，給藥前2 wk至整個試驗過程結束未服任何其它藥物，試驗期間禁忌煙酒. 20名健康志愿者隨機分成兩組，禁食12 h，于早晨服藥前采空白血，6:30開始陸續服用參比制劑或受試制劑，劑量均為200 mg，給藥后0.5，1，2，3，4，5，6，8，12，24，36，48，72，96，120，144 h，各采集靜脈血4 mL，血樣置標號塑料試管中，室溫放置2 h，3000 r/min低溫離心20 min，分取血漿，置-30℃冰箱保存，測定前自然解凍，間隔1 wk，自身交叉服用另一制劑.

1.2.2樣品處理與測定取0.2 mL血漿樣品，加入20 μL 500 mL/L三氯乙酸，漩渦振蕩， 4℃下離心5 min（15 000 r/min），取上清液25 μL進樣，HPLC分析，以外標法進行定量.

1.2.3方法學考察與評價色譜柱： Hypersil C18柱（150 mm×4.6 mm，0.5 μm）；流動相：乙腈: 0.01 mol/L磷酸二氫鈉（含0.01 mol/L三乙胺，磷酸調pH至5.0）= 18∶82(V/V)；流速：1.0 mL/min；柱溫：45℃；檢測波長：240 nm；進樣量：25 μL；靈敏度：0.01AUFS. 取健康人的空白血漿0.2 mL，分別加入奈韋拉平系列標準液，配成0.1， 0.5， 1.0， 2.0， 3.5和5.0 mg/L的血漿樣品，混勻，按血漿樣品處理項處理后作HPLC分析. 以樣品峰面積（X）對藥物濃度（C）進行線性回歸，得回歸方程：C =81.45 X + 58.65（r=0.9995），奈韋拉平在0.1~5.0 mg/L范圍內，線性關系良好. 最低檢測濃度為0.1 mg/L. 采用DAS 1. 0軟件進行參數計算，Cmax，Tmax用實測值表示，AUC0-t用梯形法計算，時間范圍取0 ~ 144 h，AUC（0-∞）=AUC（0-t）+Ct/λZ，Ct為最后一點的血藥濃度，λZ為末端相消除速度常數，t1/2可按t1/2=0.693/λZ求出. 相對生物利用度的計算公式：F1=［ AUC（0-t）（受試制劑）/AUC（0-t）（參比制劑）］ × 100%， F2=［AUC（0-∞）（受試制劑）/AUC（0-∞）（參比制劑）］×100%.

2結果

奈韋拉平國產膠囊劑和進口片劑的有關藥代動力學參數及生物等效性見表1，經統計學檢驗，兩者之間的差異無顯著性意義（P>0.05）. 本次研究有多名受試者發生輕度不良反應，表現為惡心、乏力、頭痛、腹痛等.

表1奈韋拉平國產膠囊和進口片劑的藥代動力學參數及相對生物利用度略 3討論

我們采用高效液相色譜法測定人血漿中奈韋拉平濃度［2］，其流動相的配制及血樣的提取方法均較為簡單、經濟，回收率高，峰形良好，血漿中內源性雜質不干擾藥物的測定. 主要藥動學參數經對數轉換和不轉換后使用雙單側檢驗法，檢驗參比制劑和受試制劑的等效性和置信區間，所得結果一致. 相對生物利用度為F1=101.50%，F2=102.00%，奈韋拉平國產膠囊劑和進口片劑的兩組參數中Cmax， Tmax， AUC（0-144h），AUC（0-∞）均經對數轉換后進行方差分析和雙單側t檢驗，其差異無顯著性，即受試制劑和參比制劑生物等效.

【參考文獻】 ［1］ Manosuthi W， Sungkanuparph S， Vibhagool A， et al. Nevirapine versus efavirenzbased highly active antiretroviral therapy regimens in antiretroviralnaive patients with advanced HIV infection［J］. HIV Med， 2004， 5(2):105-109. ［2］ Lopez RM， Pou L， Gomez MR， et al. Simple and rapid determination of nevirapine in human serum by reversedphase highperformance liquid chromatography［J］. J Chromatogr B Biomed Sci Appl， 2001， 751(2):371-376.