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摘要：目的:研究細(xì)胞連接蛋白Lnk對(duì)人上皮性卵巢腫瘤細(xì)胞中胰島素PI3K/Akt和MAPK/ERK信號(hào)通路的影響及作用機(jī)制。方法:穩(wěn)定轉(zhuǎn)染Lnk WT質(zhì)粒(空質(zhì)粒EV作為對(duì)照)的TOV112D和OVCA420細(xì)胞株,加入人重組胰島素處理后收獲細(xì)胞,提取蛋白。Western blot法檢測(cè)磷酸化和總Akt、ERK和4EBP1信號(hào)通路蛋白。并在293T細(xì)胞中共轉(zhuǎn)染IR和Lnk WT或EV質(zhì)粒,收獲細(xì)胞裂解蛋白。免疫共沉淀(CoIP)檢測(cè)體外Lnk和胰島素受體(IR)是否結(jié)合。結(jié)果:過(guò)度表達(dá)了Lnk WT的TOV112D和OVCA420細(xì)胞中,Akt及其下游信號(hào)蛋白4-EBP1的磷酸化蛋白(p-Akt和p-4EBP1)、p-ERK1/2蛋白均較空質(zhì)粒(EV)對(duì)照明顯降低;胰島素刺激下,Lnk WT過(guò)表達(dá)細(xì)胞Akt、4EBP1、ERK1/2磷酸化水平也較EV明顯降低;總蛋白則無(wú)明顯變化。免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)顯示,Lnk與IR在體外可結(jié)合。結(jié)論:Lnk可通過(guò)與IR結(jié)合,負(fù)性調(diào)節(jié)對(duì)胰島素反應(yīng)的PI3K-Akt和MAPK-ERK細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo);其作為胰島素信號(hào)通路的一個(gè)新抑制因子,可能在上皮性卵巢腫瘤及其他胰島素信號(hào)通路異常相關(guān)性疾病中起作用。

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