小鼠、大鼠、食蟹猴與人的脂肪干細胞分離培養方法和生物學特性的比較分析
摘要：目的 比較分析實驗動物脂肪間充質干細胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs)與人脂肪間充質干細胞的分離培養方法和生物學特性的差異,為自體脂肪干細胞移植治療人類疾病的臨床前研究提供臨床前的實驗數據和方法。方法 將臨床患者、食蟹猴、C57小鼠和SD大鼠的皮下脂肪組織進行分離培養后得到人脂肪間充質干細胞(hADSCs)、食蟹猴脂肪間充質干細胞(cynomolgus monkey adipose-derived mesenchymal stem cells,cADSCs)、小鼠脂肪間充質干細胞(mouse adipose-derived mesenchymal stem cells,mADSCs)和大鼠脂肪間充質干細胞(rat adipose-derived mesenchymal stem cells,rADSCs);采用流式細胞術鑒定ADSCs表面標記物;細胞成脂、成骨誘導分化,于誘導后21 d和28 d固定染色,鑒定ADSCs的成脂成骨分化能力。結果 hADSCs、cADSCs、mADSCs和rADSCs的分離培養方法類似,貼壁培養后均呈成纖維細胞樣生長;流式檢測顯示,不同物種ADSCs間充質干細胞表面標記物CD90、CD29為陽性,少量表達造血干細胞標記物CD34,血管內皮細胞標記物CD31為陰性。成脂和成骨分化能力檢測顯示,hADSCs、cADSCs、mADSCs和rADSCs和均具有成脂成骨分化能力,但其成脂成骨分化的時間略有差異。結論 實驗動物ADSCs與hADSCs采用相同的分離培養方法,有類似的表面標記物表達及成脂成骨分化潛能,生物學特性具有一致性,是自體脂肪干細胞移植臨床前研究的良好模型。
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