三葉因子3在甲狀腺乳頭狀癌TPC-1細胞株黏附中的作用機制
摘要:目的:探討沉默三葉因子3(TFF3)表達對甲狀腺乳頭狀癌(PTC)TPC-1細胞黏附作用的影響。方法:穩(wěn)定敲低TFF3表達的TPC-1細胞株(shRNA-TFF3組)、轉(zhuǎn)染空載體的TPC-1細胞株(shRNAC組)、TPC-1細胞(TPC-1組)分別進行同質(zhì)黏附實驗、異質(zhì)黏附實驗;qPCR檢測TFF3 mRNA及WNT/β-catenin信號通路關(guān)鍵分子β-catenin mRNA水平,免疫印跡和免疫細胞化學(xué)檢測β-catenin、E-cadherin、ALCAM、MMP-9、MMP-2蛋白表達水平。結(jié)果:細胞同質(zhì)黏附實驗顯示shRNA-TFF3組黏附細胞數(shù)顯著高于shRNAC組和TPC-1組。細胞異質(zhì)實驗顯示shRNA-TFF3組黏附細胞數(shù)顯著低于shRNAC組和TPC-1組,shRNAC組和TPC-1組同質(zhì)和異質(zhì)黏附數(shù)差異無統(tǒng)計學(xué)意義。qPCR結(jié)果顯示shRNA-TFF3組TFF3 mRNA、β-catenin mRNA水平顯著低于shRNAC組和TPC-1組,shRNAC組和TPC-1組TFF3 mRNA、β-catenin mRNA水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義。免疫細胞化學(xué)與免疫印跡結(jié)果顯示沉默TFF3后ALCAM、MMP-9、MMP-2、β-catenin蛋白表達水平顯著降低;E-cadherin蛋白表達水平顯著升高,shRNAC組和TPC-1組差異無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論:敲低TFF3可能通過WNT/β-catenin信號通路影響PTC細胞TPC-1的黏附能力。
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