敲低金屬蛋白酶組織抑制物1(TIMP-1)抑制TGF-β1誘導的MRC-5人胚肺成纖維細胞增殖和膠原蛋白合成
摘要：目的探討敲低金屬蛋白酶組織抑制物1(TIMP-1)對轉化生長因子β1(TGF-β1)誘導的MRC-5人胚肺成纖維細胞生長的影響。方法將MRC-5細胞分為空白組、 TGF-β1組、轉染陰性對照小干涉RNA的TGF-β1組和轉染TIMP-1小干涉RNA(siTIMP-1)的TGF-β1組。噻唑藍(MTT)法檢測細胞活力,流式細胞術檢測細胞周期分布, ELISA檢測上清液腫瘤壞死因子α(TNF-α)含量, Western blot法檢測TIMP-1、α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)、 1型膠原蛋白(Col1)和β聯蛋白(β-catenin)的蛋白水平。結果轉染siTIMP-1組的MRC-5細胞TIMP-1蛋白水平明顯降低。與空白組相比, TGF-β1組細胞活力明顯升高、 G0/G1期細胞百分比明顯降低、 S期和G2/M期細胞百分比明顯升高, TNF-α含量明顯升高,α-SMA、 Col1和β-catenin的蛋白水平均明顯升高。與TGF-β1組相比,敲低TIMP-1水平后,細胞活力明顯降低、 G0/G1期細胞百分比明顯升高、 S期和G2/M期細胞百分比明顯降低, TNF-α含量明顯降低,α-SMA、 Col1和β-catenin蛋白表達均明顯降低。轉染陰性對照小干涉RNA的細胞與TGF-β1組各項指標均無明顯差異。結論敲低TIMP-1水平可抑制MRC-5細胞增殖活性、減少膠原蛋白合成及TNF-α釋放,可能與抑制Wnt/β-catenin信號通路有關。
注: 保護知識產權,如需閱讀全文請聯系細胞與分子免疫學雜志社
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