基于SSR熒光標(biāo)記的白蠟核心種質(zhì)構(gòu)建
摘要:白蠟為中國(guó)北方重要的鹽堿地造林樹(shù)種,研究其遺傳多樣性,進(jìn)一步構(gòu)建核心種質(zhì),對(duì)白蠟優(yōu)異種質(zhì)的篩選及開(kāi)發(fā)利用具有重要作用,為廣泛開(kāi)展白蠟種質(zhì)資源的保存評(píng)價(jià)、挖掘優(yōu)異基因資源提供核心材料,同時(shí)也為白蠟育種提供優(yōu)良基因資源。本研究運(yùn)用SSR標(biāo)記的方法,選取田間表型性狀差異較大的4個(gè)白蠟品種華雄、魯蠟5號(hào)、金葉白蠟和金枝白蠟,采用聚丙烯酰胺凝膠電泳從500對(duì)SSR引物中篩選出擴(kuò)增條帶清晰、多態(tài)性好、擴(kuò)增穩(wěn)定的42對(duì)引物。從篩選出的每對(duì)引物5′端添加熒光標(biāo)記后,采用毛細(xì)管法通過(guò)DNA分析儀檢測(cè)202個(gè)樣品不同等位變異的擴(kuò)增片段,從42對(duì)SSR引物中篩選出17對(duì)擴(kuò)增穩(wěn)定的引物,建立基于高通量熒光SSR標(biāo)記的白蠟種質(zhì)鑒定體系。研究了來(lái)自全國(guó)22個(gè)地區(qū)的具有代表性的202份白蠟種質(zhì)資源的遺傳多樣性,通過(guò)R語(yǔ)言包Genetic Subsetter構(gòu)建出了40份白蠟核心種質(zhì)。結(jié)果表明:選用的17對(duì)引物都表現(xiàn)出多態(tài)性,共檢測(cè)出142個(gè)等位變異,平均每對(duì)引物等位基因數(shù)為8.353個(gè);平均有效等位基因數(shù)為3.342;平均多態(tài)性信息含量為0.635。可見(jiàn)白蠟屬植物種間變異較大,具有豐富的遺傳多樣性。構(gòu)建了40份白蠟核心種質(zhì),占原始種質(zhì)的20%,t檢測(cè)表明,所構(gòu)建的核心種質(zhì)遺傳多樣性豐富,其代表的遺傳多樣性指標(biāo)與原始種質(zhì)資源差異不顯著,說(shuō)明獲得的核心種質(zhì)資源能夠充分、最大程度地代表原始種質(zhì)。研究結(jié)果為白蠟種質(zhì)資源的收集、保護(hù)、評(píng)價(jià)及利用提供了寶貴的理論依據(jù)和物質(zhì)基礎(chǔ)。利用17對(duì)高效引物構(gòu)建了白蠟屬植物SSR高通量鑒定體系,構(gòu)建的40份白蠟核心種質(zhì)能夠最大程度的代表其遺傳多樣性。
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