錨定表達豬IFN-λ3重組植物乳桿菌的構建及其抗PEDV效果的檢測
摘要：為構建錨定表達豬IFN-λ3的重組植物乳桿菌(L.plantarum),并驗證其抗病毒活性,本研究將豬IFN-λ3基因插入大腸桿菌-乳酸菌穿梭錨定表達載體pSIP-409-pgsA'中構建重組質粒pSIP-409-pgsA'-IFN-λ3,將其電轉化至植物乳桿菌NC8中獲得重組pSIP-409-pgsA'-IFN-λ3/L.plantarum。經清酒乳桿菌素(SPPIP)誘導后用His標簽單克隆抗體經westernblot、間接免疫熒光檢測目的蛋白的錨定表達情況。結果顯示,豬IFN-λ3在重組植物乳桿菌表面錨定表達。利用重組菌刺激細胞后通過熒光定量PCR測定IPEC-J2/PEDV系統中豬流行性腹瀉病毒(PEDV)載量,并檢測該重組菌刺激細胞后干擾素刺激基因(ISGs)的相對轉錄水平。結果顯示,該重組菌能夠顯著抑制PEDV在IPEC-J2中的復制,并能誘導細胞中ISGs(OASL、IFITMs)的高轉錄水平,具有抗病毒作用。本研究為PEDV的預防和治療提供可行方案。
注: 保護知識產權,如需閱讀全文請聯系中國預防獸醫學報雜志社
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