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加急見刊

舌鱗癌化療耐藥相關線粒體微小RNA的篩選和鑒定

林欣祤; 陳偉雄; 雷新元; 歐展鵬; 范松; 李勁松 中山大學孫逸仙紀念醫(yī)院口腔頜面外科; 廣東廣州510120

摘要:目的探討舌鱗癌細胞線粒體微小RNA(mitochondrial microRNAs,mitomiRs)的表達,篩選出與化療耐藥相關的mitomiRs。方法提取舌鱗癌細胞系CAL-27及其順鉑耐藥細胞株CAL-27-re的線粒體、細胞質(zhì)、總細胞RNA,采用高通量miRNA芯片篩選出耐藥和親本細胞中差異表達的mitomiRs,應用qRT-PCR驗證在CAL-27和CAL-27-re中表達上調(diào)的mitomiRs,并在化療耐藥及敏感的舌鱗癌患者樣本中驗證表達上調(diào)的mitomiRs。結果芯片結果顯示,在CAL-27和CAL-27-re的線粒體、細胞質(zhì)和總細胞RNA共6個組分中共檢測到263個miRNA,其中共有57個mitomiRs和134個細胞質(zhì)微小RNA(cytoplasmic microRNAs,cytomiRs);與總miRNA相比,CAL-27-re細胞中有35個mitomiRs表達上調(diào),CAL-27細胞中有31個mitomiRs表達上調(diào)(≥1.5倍)。進一步比較分析親本和耐藥細胞中差異表達的mitomiRs,在CAL-27-re細胞中有miR-2392、miR-4462、miR-1290、miR-4449、miR-1268a、miR-1246、miR-371a-5p、miR-3934-5p、miR-4271、miR-513p、miR-664b-3p共11個mitomiRs表達上調(diào);而5個表達下調(diào)的mitomiRs則分別是miR-188-5p、miR-1973、miR-3653、miR-4499、miR-5787;其他41個mitomiRs在兩種細胞株中的表達水平幾乎相同。qRT-PCR與miRNAs芯片結果相符合,并且在CAL-27和CAL-27-re中得到驗證的11個表達上調(diào)的mitomiRs中,有miR-1268a、miR-2392、miR-4462、miR-1290、miR-4449共5個mitomiRs在化療耐藥舌鱗癌臨床樣本中也同樣表達上調(diào)。結論順鉑化療耐藥和敏感的舌鱗癌細胞中存在差異表達的mitomiRs,特異高表達的mitomiRs:miR-1268a、miR-2392、miR-4462、miR-1290、miR-4449可能在舌鱗癌化療耐藥中具有重要作用.

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