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摘要：目的研宄自噬相關(guān)基因Atg5在肌萎縮側(cè)索硬化癥(ALS)轉(zhuǎn)基因小鼠紋狀體和腦干中的表達(dá)情況,探討Atg5與ALS發(fā)病的關(guān)系。方法分別取ALS轉(zhuǎn)基因小鼠和同窩野生型小鼠95d、108d和122d的紋狀體和腦干,應(yīng)用免疫熒光技術(shù)檢測(cè)Atg5在紋狀體和腦干中的表達(dá)及與神經(jīng)元的共定位關(guān)系,應(yīng)用qRT-PCR技術(shù)檢測(cè)Atg5 mRNA表達(dá)情況,應(yīng)用Western blot技術(shù)檢測(cè)蛋白表達(dá)的改變。結(jié)果免疫熒光雙標(biāo)染色檢測(cè)發(fā)現(xiàn),ALS轉(zhuǎn)基因小鼠和野生型小鼠紋狀體和腦干中Atg5陽性細(xì)胞與P-tubulin III標(biāo)記的神經(jīng)元共表達(dá);與野生型小鼠比較,ALS轉(zhuǎn)基因小鼠紋狀體和腦干內(nèi)舌下神經(jīng)核和面神經(jīng)核中Atg5免疫反應(yīng)性降低;qRT-PCR分析顯示,ALS轉(zhuǎn)基因小鼠紋狀體內(nèi)Atg5 mRNA表達(dá)水平在95d、108d和122d時(shí)均顯著低于同窩野生型小鼠紋狀體內(nèi)Atg5 mRNA表達(dá)水平;腦干內(nèi)Atg5 mRNA表達(dá)水平在108d和122d時(shí)均顯著低于同窩野生型小鼠腦干內(nèi)Atg5 mRNA表達(dá)水平;Western bot分析顯示,與野生型小鼠比較,ALS轉(zhuǎn)基因小鼠紋狀體和腦干內(nèi)Atg5蛋白表達(dá)水平在l08d和122d時(shí)顯著降低。結(jié)論ALS轉(zhuǎn)基因小鼠紋狀體和腦干中Atg5的表達(dá)降低,提示Atg5調(diào)控的自噬改變與ALS發(fā)病關(guān)系密切。

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