外源性H2S恢復缺氧后適應對衰老H9C2細胞的保護作用及機制
摘要：目的：探討外源性硫化氫（H2S）恢復缺氧后適應對衰老H9C2細胞的保護作用及相關機制。方法：H9C2細胞（心肌細胞系）用30μmol/L過氧化氫（H2O2）處理2 h后再培養3 d,誘導生成衰老細胞。衰老H9C2細胞被隨機分5組（n=8）：正常組（Control）、缺氧/復氧組（H/R）、H/R＋NaHS組、缺氧后適應（PC）組、PC＋NaHS組。缺氧/復氧（H/R）模型：衰老H9C2細胞用缺氧液（無血清、無糖培養基,p H=6.8）培養3 h,然后正常培養6h;缺氧后適應（PC）模型：方法同H/R模型,缺氧結束復氧前連續進行3次5 min間隔的復氧/再缺氧處理,隨后復氧6 h。ELISA試劑盒分別檢測大鼠晚期糖基化終末產物（AGEs）含量和caspase-3活性; CCK-8試劑盒檢測細胞活力; DCFH-DA染色檢測活性氧（ROS）水平; Hoechst 33342染色檢測細胞凋亡率; Real-time PCR檢測相關基因m RNA水平。結果：30μmol/L H2O2可誘導H9C2細胞衰老但不會導致其凋亡;與Control組比較,H/R和PC均降低細胞活力,增加細胞凋亡率、ROS水平及caspase-3、caspase-9和Bcl-2 m RNA水平（P〈0.01）;且PC組與H/R組比較,上述指標變化無明顯差異;在H/R和PC組加入NaHS,可顯著提高細胞活力,降低細胞凋亡率和氧化應激; PC＋NaHS對上述指標的作用明顯強于H/R＋NaHS。結論：外源性H2S能夠恢復PC對衰老H9C2細胞的保護作用,其機制與抑制氧化應激和細胞凋亡有關。
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