miR-155對SD大鼠晶狀體上皮凋亡抑制作用的初步研究
摘要:目的研究微小核糖核酸(miR)-155對高糖誘導的人晶狀體囊膜上皮細胞(HLEpiC)和SD大鼠晶狀體細胞凋亡的抑制作用。方法晶狀體取自正常SD大鼠,晶狀體直接進行體外分組培養,晶狀體培養組與細胞培養分組相同,培養時間為72 h。低糖(LG)培養基處理HLEpiC至密度為30%~40%,設置不同的培養組來進行加藥處理,培養組包括:5.5 mmol/L低糖(LG)培養基組,25 mmol/L甘露醇,25 mmol/L高糖(HG)培養基組,模擬生物體內源的miR-155用藥組(mimic),藥物對照組(CTm)。用藥組分別加入30 nmol/L的miR-155培養48 h。通過Western blot檢測不同處理組細胞蛋白和組織凋亡相關蛋白Bcl-2相關X蛋白(Bax)、B細胞淋巴瘤基因2(Bcl-2)以及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)家族相關蛋白caspase-3和caspase-9表達量。結果在模擬生物體內源的miRNAs(mimic)的濃度為30 nmol/L時,可以改變高糖引起的晶狀體渾濁。30 nmol/L 的mimic對HLEpiC的增殖能力有明顯的促進作用。與高糖對照組相比,加藥組凋亡相關的表達量有明顯的變化,促凋亡蛋白Bax以及凋亡效應蛋白caspase-3的表達量明顯下調,而抑凋亡蛋白Bcl-2和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶前體蛋白(procaspase-9)表達量明顯上調。結論 miR-155通過抑制細胞凋亡的發生來抑制由高糖引起的HLEpiC和SD大鼠晶狀體細胞凋亡的發生。
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