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基于RT-LAMP的10種烈性病毒快速檢測方法的研究

趙娜; 趙望; 劉淇; 夏菡; 師永霞; 袁志明 中國科學院武漢病毒研究所; 武漢430071; 上海科源電子科技有限公司; 上海201611; 復旦大學環境科學與工程系; 上海200433; 廣東出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心; 廣州510627

摘要:類健康威脅較大的烈性病毒建立反轉錄-環介導等溫擴增法(reverse transcription-loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP),篩選出10種烈性病毒高特異性引物,并分別對這10種病毒進行特異檢測。結果顯示,其安全、便捷、快速,且高通量。在自主研發的RT-LAMP體系中,只需加入模板,結合配套儀器,擴增耗時不超過45 min,檢測靈敏度為1-100拷貝/反應(25 μL)。檢測30份人血清樣品,篩查出1份裂谷熱病毒陽性。該方法操作簡單,可防止污染,成本低,易攜帶,方便于低配實驗室或現場進行實時高通量檢測。結果提示,針對10種烈性病毒的RT-LAMP方法可對口岸等人員流動性大的地區疑似患者進行快速篩查,展現出良好的應用前景。

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