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基于RT-LAMP的10種烈性病毒快速檢測(cè)方法的研究

趙娜; 趙望; 劉淇; 夏菡; 師永霞; 袁志明 中國科學(xué)院武漢病毒研究所; 武漢430071; 上?？圃措娮涌萍加邢薰? 上海201611; 復(fù)旦大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程系; 上海200433; 廣東出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心; 廣州510627

摘要：類健康威脅較大的烈性病毒建立反轉(zhuǎn)錄-環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增法（reverse transcription-loop-mediated isothermal amplification，RT-LAMP），篩選出10種烈性病毒高特異性引物，并分別對(duì)這10種病毒進(jìn)行特異檢測(cè)。結(jié)果顯示，其安全、便捷、快速，且高通量。在自主研發(fā)的RT-LAMP體系中，只需加入模板，結(jié)合配套儀器，擴(kuò)增耗時(shí)不超過45 min，檢測(cè)靈敏度為1-100拷貝/反應(yīng)（25 μL）。檢測(cè)30份人血清樣品，篩查出1份裂谷熱病毒陽性。該方法操作簡(jiǎn)單，可防止污染，成本低，易攜帶，方便于低配實(shí)驗(yàn)室或現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行實(shí)時(shí)高通量檢測(cè)。結(jié)果提示，針對(duì)10種烈性病毒的RT-LAMP方法可對(duì)口岸等人員流動(dòng)性大的地區(qū)疑似患者進(jìn)行快速篩查，展現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景。

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