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摘要：目的 探討不同擴(kuò)增方法和探針長(zhǎng)度對(duì)植入前單個(gè)卵裂球比較基因組雜交（comparativegenomic hybridization，CGH）檢測(cè)結(jié)果的影響，為植入前產(chǎn)前診斷奠定基礎(chǔ)。方法隨機(jī)將20枚植入前6～8細(xì)胞期胚胎卵裂球分為A和B組（各10枚），取1名正常男性外周血20枚淋巴細(xì)胞，分為C和D組（各10枚）作為對(duì)照。A和c組經(jīng)簡(jiǎn)并寡聚核苷酸聚合酶鏈反應(yīng)（degenerate oligonueleotide primedpolymerase chainreaction，DOPPCR）、B和D組經(jīng)多重置換擴(kuò)增（multiple displacement amplification，MDA）分別進(jìn)行全基因組擴(kuò)增（wholegenomeamplification，WGA），用上述全基因組擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行PCR擴(kuò)增TBX1基因2號(hào)外顯子，驗(yàn)證其特異性。將獲得的WGA產(chǎn)物制備成250～750bp和750～2000bp2種不同長(zhǎng)度的探針與正常男性中期染色體核型進(jìn)行雜交，Y染色體性別決定區(qū)（sex—determiningregionofY，SRY）基因驗(yàn)證CGH檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果（1）用DOP—PCR擴(kuò)增時(shí)，A組10枚卵裂球中有9枚WGA成功，C組10枚淋巴細(xì)胞WGA均成功；但其擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)一步擴(kuò)增TBX1基因2號(hào)外顯子時(shí)，出現(xiàn)較多非特異性條帶。CGH檢測(cè)中，5例卵裂球用長(zhǎng)度250～750bp的探針檢測(cè)時(shí)，1例失敗，1例CGH軟件核型分析結(jié)果與SRY結(jié)果不一致。（2）經(jīng)MDA的B和D組，均WGA成功；其產(chǎn)物進(jìn)一步擴(kuò)增TBX1基因2號(hào)外顯子時(shí)，非特異性條帶少。CGH檢測(cè)中，探針長(zhǎng)度為250～750bp的5例卵裂球均檢測(cè)成功，且與SRY驗(yàn)證結(jié)果一致。（3）用長(zhǎng)度為750～2000bp探針檢測(cè)時(shí)，雜交效果不好。結(jié)論單卵裂球全基因組擴(kuò)增，MDA較DOPPcR方法穩(wěn)定，特異性強(qiáng)，CGH檢測(cè)中，擴(kuò)增產(chǎn)物酶切至250～750bp制備的探針雜交圖像均勻、清晰，軟件分析核型結(jié)果穩(wěn)定、準(zhǔn)確。

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