二維電泳分析胎兒酒精綜合征斑馬魚模型蛋白表達譜
摘要：目的 利用二維電泳分析乙醇誘導斑馬魚胚胎發育畸形的可能分子機制。方法采用400mmol／L乙醇在斑馬魚胚胎圓頂期處理3h，觀察乙醇導致的斑馬魚胚胎發育畸形；通過二維凝膠電泳分析受精卵期、圓頂期、胚盾期和5體節期的胚胎總蛋白，采用差減分析法減少母源性蛋白的干擾，比較5-體節期正常對照組和乙醇處理組斑馬魚胚胎蛋白表達譜的改變；通過原位雜交驗證二維電泳的分析結果。結果400mmol／L乙醇處理導致62％的胚胎產生體軸發育障礙和60％的胚胎產生獨眼畸形。二維電泳分析結果顯示，400mmol／L乙醇處理會導致受精后12h（12hourspostfertilization，12hpf）斑馬魚胚胎膠原蛋白2al和TARDNA結合蛋白表達分別下調81％和73％。隨后原位雜交顯示，膠原蛋白2al在乙醇處理組胚胎體軸的表達明顯下調；24hpf乙醇處理胚胎膠原蛋白2al在胚胎體軸的表達水平逐漸恢復正常，但神經管結構受到嚴重影響。結論乙醇處理后斑馬魚胚胎發育畸形可能是由于乙醇干擾了胚胎發育過程中膠原蛋白2al和TARDNA結合蛋白的表達；其中乙醇對膠原蛋白2al在軸中胚層早期表達的干擾，可能是導致發育后期體軸和神經管畸形的重要原因。
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