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摘要：目的 利用二維電泳分析乙醇誘導(dǎo)斑馬魚胚胎發(fā)育畸形的可能分子機制。方法采用400mmol／L乙醇在斑馬魚胚胎圓頂期處理3h，觀察乙醇導(dǎo)致的斑馬魚胚胎發(fā)育畸形；通過二維凝膠電泳分析受精卵期、圓頂期、胚盾期和5體節(jié)期的胚胎總蛋白，采用差減分析法減少母源性蛋白的干擾，比較5-體節(jié)期正常對照組和乙醇處理組斑馬魚胚胎蛋白表達譜的改變；通過原位雜交驗證二維電泳的分析結(jié)果。結(jié)果400mmol／L乙醇處理導(dǎo)致62％的胚胎產(chǎn)生體軸發(fā)育障礙和60％的胚胎產(chǎn)生獨眼畸形。二維電泳分析結(jié)果顯示，400mmol／L乙醇處理會導(dǎo)致受精后12h（12hourspostfertilization，12hpf）斑馬魚胚胎膠原蛋白2al和TARDNA結(jié)合蛋白表達分別下調(diào)81％和73％。隨后原位雜交顯示，膠原蛋白2al在乙醇處理組胚胎體軸的表達明顯下調(diào)；24hpf乙醇處理胚胎膠原蛋白2al在胚胎體軸的表達水平逐漸恢復(fù)正常，但神經(jīng)管結(jié)構(gòu)受到嚴重影響。結(jié)論乙醇處理后斑馬魚胚胎發(fā)育畸形可能是由于乙醇干擾了胚胎發(fā)育過程中膠原蛋白2al和TARDNA結(jié)合蛋白的表達；其中乙醇對膠原蛋白2al在軸中胚層早期表達的干擾，可能是導(dǎo)致發(fā)育后期體軸和神經(jīng)管畸形的重要原因。

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