午夜亚洲国产日本电影一区二区三区,九九久久99综合一区二区,国产一级毛片视频,草莓视频在线观看精品最新

加急見(jiàn)刊

穩(wěn)定表達(dá)人乳頭瘤病毒16E7蛋白HaCaT細(xì)胞株的建立

繆飛 王秀麗 王宏偉 丁蕙琳 呂婷 張玲琳 上海市皮膚病醫(yī)院 200050

摘要：目的建立穩(wěn)定表達(dá)人乳頭瘤病毒（HPV）16E7蛋白的HaCaT細(xì)胞株。方法利用PCR及酶切技術(shù)擴(kuò)增出CaSki細(xì)胞中HPV16E7基因并定向克隆到真核細(xì)胞表達(dá)載體pcDNA3．1（＋）中．構(gòu)建真核表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3．1（＋）-HPV16E7。將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染人HaCaT細(xì)胞，經(jīng)G418篩選穩(wěn)定表達(dá)HPV16E7蛋白的細(xì)胞株并予以鑒定。結(jié)果經(jīng)酶切、測(cè)序鑒定構(gòu)建pcDNA3．1（＋）-HPV16E7成功。RT—PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳后檢測(cè)到HPV16E7mRNA表達(dá)的特異性297bp條帶；Western印跡可檢測(cè)到E7蛋白穩(wěn)定表達(dá)。結(jié)論成功構(gòu)建m穩(wěn)定表達(dá)HPV16E7蛋白的HaCaT細(xì)胞株。

注: 保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán),如需閱讀全文請(qǐng)聯(lián)系中華皮膚科雜志社