喜樹(shù)堿(CPT)誘導(dǎo)前列腺癌PC-3細(xì)胞凋亡及其機(jī)制的研究
摘要:目的測(cè)定不同濃度的喜樹(shù)堿(CPT)對(duì)前列腺癌PC-3細(xì)胞的促凋亡作用,并進(jìn)一步探討其促凋亡機(jī)制。方法人前列腺癌PC-3細(xì)胞,加入不同濃度的CPT(10-100μmol/L),繼續(xù)培養(yǎng)24 h。采用形態(tài)學(xué)觀察及MTT方法檢測(cè)細(xì)胞增殖,流式細(xì)胞儀測(cè)細(xì)胞早期凋亡率。Western blot法檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3和PARP的表達(dá)。結(jié)果形態(tài)學(xué)觀察及MTT試驗(yàn)顯示,不同濃度的CPT可導(dǎo)致PC-3細(xì)胞形態(tài)改變,并對(duì)其生長(zhǎng)有明顯抑制作用,具有劑量依賴(lài)性,其IC50為23.25μmol/L;細(xì)胞凋亡檢測(cè)表明不同濃度的CPT可使早期凋亡比率增加。Western blot結(jié)果顯示,不同濃度CPT可使PC-3細(xì)胞Bcl-2蛋白表達(dá)降低,而B(niǎo)ax和Cleaved Caspase-3蛋白,89-k Da PRPP蛋白表達(dá)增加且呈劑量依賴(lài)性。結(jié)論 CPT可以誘導(dǎo)PC-3細(xì)胞凋亡,其作用機(jī)制可能為激活Caspase依賴(lài)途徑,并活化其作用底物PARP來(lái)實(shí)現(xiàn)。
注: 保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán),如需閱讀全文請(qǐng)聯(lián)系毒理學(xué)雜志社