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gltA基因?qū)S腸球菌生物膜形成能力影響的初步研究

仇珺; 肖燕; 相豆豆; 史晨楠; 程小剛; 田宇; 余擎 軍事口腔醫(yī)學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、口腔疾病國(guó)家臨床醫(yī)學(xué)研究中心、陜西省口腔疾病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院牙體牙髓病科; 陜西西安710032; 中國(guó)人民解放軍第十五醫(yī)院口腔科; 新疆烏蘇833000

摘要:目的:探討糞腸球菌(E.faecalis)谷氨酸合酶基因A(gltA)對(duì)生物膜形成的影響。方法:采用激光共聚焦掃描電鏡(CLSM)觀察臨床分離的4株E.faecalis的生物膜形成能力、生物膜體積及活菌數(shù);用RT-qPCR檢測(cè)4株臨床菌株的gltA基因表達(dá)水平的變化;構(gòu)建gltA基因高表達(dá)E.faecalis菌株,以標(biāo)準(zhǔn)菌V583為對(duì)照,分別觀察兩者生長(zhǎng)曲線的變化及24 h內(nèi)的生物膜形成情況,同時(shí)檢測(cè)其生物膜的體積及活菌數(shù)。結(jié)果:4株E.faecalis臨床菌株均能形成結(jié)構(gòu)致密的生物膜,其生物膜體積及其活菌數(shù)均顯著高于標(biāo)準(zhǔn)株V583(P〈0.05);4株臨床菌株的gltA基因表達(dá)量均隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加而明顯降低,在培養(yǎng)6、12 h時(shí),4株臨床菌株的gltA基因表達(dá)顯著高于標(biāo)準(zhǔn)株V583(P〈0.05);培養(yǎng)24 h時(shí),4株臨床菌株的gltA基因表達(dá)量與標(biāo)準(zhǔn)株V583相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P〉0.05)。gltA基因高表達(dá)株的生長(zhǎng)速率與標(biāo)準(zhǔn)株相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P〉0.05);gltA基因高表達(dá)株生物膜形成較快,結(jié)構(gòu)更加致密且厚度較厚,而標(biāo)準(zhǔn)株V583的生物膜形成較慢,較薄,且gltA基因高表達(dá)株在12、24 h時(shí)生物膜體積及其活菌數(shù)均顯著高于對(duì)照組(P〈0.05)。結(jié)論:gltA基因能在E.faecalis生物膜形成的早期階段發(fā)揮關(guān)鍵的調(diào)控作用,是E.faecalis生物膜形成的重要基因。

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